II Jornadas de Inicio a la Investigación de Estudiantes de la Facultad de Biología

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    Estudio de la expresión del receptor LAIR-1 en macrófagos humanos. Posible implicación en el desarrollo de cirrosis hepática
    (2020-04-14) Fernández-Fernández, María Dolores; Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e Inmunología
    RESUMEN El primer objetivo de este trabajo fue el estudio bibliográfico del gen LAIR-1, que codifica un receptor inhibidor descrito en fagocitos. Para ello se revisó la bibliografía publicada en revistas de investigación científica, así como las secuencias depositadas en las principales bases de datos biológicos disponibles en la red hasta el momento. Los resultados encontrados revelaron que la información depositada en las bases de datos por los diferentes autores era redundante y presentaba una nomenclatura diferente. Tras estudios de alineamiento con diferentes herramientas informáticas, pudimos establecer las equivalencias entre los datos publicados. De las 4 isoformas descritas, generadas por maduración alternativa del ARN, sólo LAIR-1a y LAIR-1b coincidieron completamente en las bases de datos consultadas. El siguiente objetivo fue el estudio de la expresión del gen LAIR-1 mediante qRT-PCR en macrófagos peritoneales obtenidos del líquido ascítico de pacientes con cirrosis hepática, y su comparación con los obtenidos para macrófagos de sangre periférica de donantes sanos, como población de referencia. Esta patología se asocia a un incremento de mediadores inflamatorios y podría estar relacionada con la desregulación de algunos de los mecanismos de control del sistema inmunitario. La qRT-PCR realizada con los cebadores diseñados para estudiar las isoformas LAIR-1a y -1b, reveló que éstas se expresan en ambas poblaciones de macrófagos. Además, los resultados mostraron que los niveles de expresión para los transcritos que codifican ambas isoformas son menores en la población de macrófagos de pacientes con cirrosis, en comparación con los macrófagos de donantes sanos. Se encontraron además diferencias significativas entre ambas poblaciones de macrófagos en la capacidad de respuesta a estímulos activadores como LPS y C. albicans. Estos resultados podrían contribuir a identificar nuevas dianas terapéuticas o diagnósticas para prevenir el daño hepático.
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    Open Access
    Evaluación de la fase circadiana mediante monitorización ambulatoria en humanos: correlación con el dim light melatonin onset
    (2020-04-14) Rol de Lama, María de los Ángeles; Madrid, Juan Antonio; Bonmatí Carrión, María de los Ángeles; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Fisiología
    RESUMEN Es fundamental desarrollar un sistema que detecte la fase endógena de forma sencilla, ya que las actuales técnicas implican cuantificación de melatonina o monitorización de temperatura central mediante sondas rectales. En este trabajo se validó un sistema de registro ambulatorio. Las variables monitorizadas, durante 10 días en 13 sujetos, fueron temperatura periférica, mediante un sensor en la muñeca; actividad y posición, utilizando un actímetro en el brazo; y luz, mediante un sensor colgado alrededor del cuello. Se obtuvo el marcador de fase estándar dim light melatonin onset (DLMO) en saliva para evaluar la precisión de las demás variables. Además, rellenaron un diario de sueño que evaluó la probabilidad de sueño y los cuestionarios de matutinidad-vespertinidad (Horne-Östberg), de calidad de sueño (Pittsburgh) y de somnolencia (Epworth) para evaluar la preferencia diurna y su influencia en la calidad del sueño. El aumento vespertino de la temperatura periférica se produjo con anterioridad a la elevación de melatonina; el descenso en la actividad, la posición, la variable compuesta TAP, y el aumento en la probabilidad de sueño, con posterioridad al incremento de melatonina. Las puntuaciones de los cuestionarios de matutinidad-vespertinidad y calidad del sueño mostraron alta correlación con el DLMO, confirmando que DLMO tardíos implican mayor vespertinidad y peor calidad del sueño. Este método permite detectar de manera precisa la fase del sistema circadiano sin modificar los hábitos de vida. Los nuevos marcadores de fase propuestos basados en el ritmo de temperatura periférica (WTOn and WTiO) serían adecuados en ámbitos clínicos en los que es fundamental conocer la fase circadiana del sujeto, como en la cronoterapia del cáncer y en la luminoterapia.
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    Open Access
    Estudio de la expresión de VSTM1 en macrófagos humanos y su posible implicación en el desarrollo de cirrosis hepática
    (2020-04-14) Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; Fernández-Fernández, María Dolores; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e Inmunología
    RESUMEN Uno de los objetivos de este trabajo fue el estudio bibliográfico del gen VSTM1, que codifica un receptor inhibidor recientemente descrito en fagocitos. Para ello se revisó la bibliografía publicada en revistas de investigación científica, así como las secuencias depositadas en las principales bases de datos biológicos disponibles en la red hasta el momento. Los resultados encontrados revelaron que la información depositada en las bases de datos por los diferentes autores era redundante y presentaban una nomenclatura diferente. Tras estudios de alineamiento con diferentes herramientas informáticas, pudimos establecer las equivalencias entre los datos publicados. De las 6 isoformas descritas, generadas por maduración alternativa del ARN, sólo algunas secuencias coincidieron en las bases de datos consultadas. Además, se detectó un error en la notación de la secuencia ACU00108, ya que se tradujo en glicina un codón que codifica para serina. El siguiente objetivo fue el estudio de la expresión del gen VSTM1 mediante qRT-PCR en macrófagos peritoneales obtenidos del líquido ascítico de pacientes con cirrosis hepática, y su comparación con los obtenidos para macrófagos de sangre periférica de donantes sanos, como población de referencia. Esta patología se asociada a un incremento de mediadores inflamatorios y podría estar relacionada con la desregulación de algunos de los mecanismos de control del sistema inmunitario. La qRT-PCR realizada con los cebadores diseñados para estudiar las isoformas VSTM1-v1 y v2, reveló que éstas se expresan en ambas poblaciones de macrófagos, siendo mayores los niveles de expresión del transcrito que codifica la isoforma proteíca de membrana (v1) que la secretada (v2). Además, la expresión génica de VSTM1-v1 aumenta con la diferenciación del macrófago. Sin embargo, aunque se aprecia una tendencia hacia una menor expresión en la población de macrófagos de pacientes con cirrosis, estas diferencias no fueron estadísticamente significativas.
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    Valoración económica de los fallos de suministro de agua en las unidades de demanda agraria de la cuenca del Segura
    (2020-04-14) Ruiz-Campuzano, Pedro; Perni, Ángel; Martínez-Pellicer, Francisco; Martínez-Paz, José Miguel; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Economía Aplicada
    RESUMEN El agua es un recurso natural esencial para el desarrollo de la actividad humana, especialmente limitante para la agricultura de regadío en regiones donde la escasez de agua es un tema crítico, como es el caso de las cuencas mediterráneas. La condición de escaso confiere al recurso hídrico la propiedad de bien económico susceptible de múltiples usos. La Directiva Marco del Agua aboga por la aplicación de instrumentos y herramientas de análisis económico para lograr una asignación eficiente del agua que permita satisfacer necesidades humanas a la vez que se garantiza el buen estado ecológico de las masas de agua. El objetivo de este trabajo es estimar el valor económico de los fallos de suministro de agua, entendidos como la diferencia entre el agua demandada y la disponibilidad real, en el sector agrario de la cuenca del Segura. La metodología empleada se basa en (i) la estimación de curvas de demanda de agua obtenidas a partir de la modelización del sistema de cultivos de regadío de la cuenca, mediante programación matemática lineal; y (ii) en la modelización de la red de flujo de la cuenca mediante un Sistema de Soporte a la Decisión que permite optimizar la satisfacción de las demandas bajo distintos escenarios de disponibilidad del recurso. Los resultados muestran que los fallos de suministro de agua en el sector agrario se acentuarán en el tiempo, con un mayor impacto económico en las áreas de agricultura intensiva del litoral. Por último, este trabajo pone de relieve la importancia del trasvase Tajo-Segura para la cuenca, cuya aportación económica anual, en términos de margen bruto directo, se estima en 253 millones de euros.
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    El patrón de producción de citocinas proinflamatorias en el líquido ascítico de pacientes con cirrosis está relacionado con la etiología viral (VHC) o alcohólica
    (2020-04-14) Fernández-Fernández, Mª Dolores; Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; Martínez-Pascual, Cristina; Antón, Gonzalo; Miras-López2, Manuel; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e Inmunología
    RESUMEN La histiopatología de la cirrosis inducida por alcohol o infección con virus de hepatitis C (VHC) es muy similar, sin embargo el perfil de expresión génica relativa a la respuesta inmunitaria en el hígado, es diferente en función de la etiología de la enfermedad. El objetivo de este trabajo es explorar las diferencias a nivel molecular, analizando el perfil inflamatorio del líquido ascítico y de macrófagos derivados de monocitos peritoneales de pacientes con cirrosis de ambas etiologías. Para ello estudiamos 45 pacientes con cirrosis y ascitis sin infección, distribuidos en función de la etiología de la enfermedad, VHC (n=15) o alcohol (n=30). Las citocinas se analizaron por ELISA en el líquido ascítico o en sobrenadantes de cultivo de macrófagos derivados de monocitos peritoneales aislados y estimulados in vitro con LPS, CpG oligodeoxinucleotidos o con la levadura Candida albicans. El contenido celular de los líquidos ascíticos fue más abundante en la etiología VHC vs alcohol, mientras no encontramos diferencias en el contenido celular en la sangre de estos pacientes. Detectamos niveles más elevados de IL-10 y menores de IL-6 e IL-12 en ascitis del grupo VHC. Los niveles de citocinas referidos al número de macrófagos derivados de monocitos, mostraron además menores niveles para TNF-α e IL-6 en este grupo. Los macrófagos derivados de monocitos aislados mantuvieron su estado in vitro durante al menos 24h de cultivo en presencia o ausencia de estimulación. Existe un patrón diferencial de migración leucocitaria desde la sangre a la cavidad peritoneal dependiendo de la etiología viral o alcohólica. La cirrosis inducida por VHC se asocia con un menor perfil inflamatorio en el líquido ascítico en comparación con la etiología alcohólica. Estos resultados podrían contribuir a identificar potenciales dianas terapéuticas o diagnósticas para enfermedades hepáticas crónicas de diferentes etiologías.