Potencialidad de la Fibroína de Seda como Scaffold para reparación y regeneración pulpar

Abstract

La fibroína de seda es una proteína de origen natural producida por el insecto Bombyx mori también conocido como gusano de seda. Se trata de una substancia que presenta propiedades cicatrizantes y regenerativas, siendo un biomaterial óptimo que podría ser utilizado en regeneración y reparación pulpar. Por otro lado, las células madre son células que presentan elevada capacidad clonogénica, de autorenovación, pudiendo diferenciarse en varios linajes celulares. Además, se pueden aislar de distintas localizaciones dentro de la cavidad oral. En nuestro caso las células madre utilizadas procedían de dientes deciduos. El objetivo de este trabajo ha sido valorar la biocompatibilidad de la fibroína de seda con células madre procedentes de dientes deciduos. A partir de dientes de leche sin afectación pulpar se realizó la extracción de pulpa dental humana (hDP), que fue disgregada enzimática y mecánicamente; se realizó el recuento y la estimación de la viabilidad celular y posterior siembra de células madre de pulpa dental de dientes deciduos. Igualmente, se fabricó un armazón tridimensional (scaffold) de fibroína de seda donde se sembraron 5000 células. Se analizó la proliferación celular mediante la técnica de Alamar Blue y la morfología de las células creciendo sobre los scaffolds se analizó a través de microscopía electrónica de barrido. Se estudió la supervivencia y morfología celular, los resultados obtenidos demostraron que los scaffolds de fibroína resultan biocompatibles para las SHEDs ya que éstas mantienen su morfología y se adhieren al mismo con facilidad y las SHEDs son capaces de proliferar sobre él. Los resultados de este trabajo in vitro avalan el uso del scaffold de fibroína de seda en ingeniería tisular con células madre de dientes deciduos. Futuros trabajos in vivo son necesarios para confirmar su posible uso en pulpotomías y en endodoncia regenerativa. Silk fibroin is a natural protein made by B. Mori insect knowing too as silk worm. It is a material which presents healing and regenerative properties, so it is an optimal biomaterial which could be used in pulp regeneration or reparation. On the other hand, mesenchymal stem cells (MSCs) are undifferentiated cells that present clonogenic capacity, self-renewal and multipotent differentiation properties, MSCs can differenciate into multiple celulars lineages. They could be found in some different locations inside the mouth. In this study we used stem cells from deciduous teeth (SHEDs). The aim of this study was to evaluate the biocompatibility of silk fibroin with stem cells from deciduous teeth. Pulp extraction was made from deciduous teeth without pulpal involvement reasons and it was enzymatically and mechanically scatters. The recount and the estimation of the cellular viability were executed, after that SHEDs sowing was done. Afterwards a silk fibroin scaffold was prepared, where 5000 cells were sown. Cell proliferation was analyzed by Alamar Blue and morphology was analyzed by scanning electron microscopy (SEM). Cell survival and cell morphology were studied, the results showed that the fibroin scaffolds are biocompatible to SHEDs because they keeps their morphology, sticks on it easily and were able to proliferate on it. This results “in vitro” support silk fibroin scaffold used in tissue structure engineering with stem cells from deciduous teeth. New in vivo studies are needed to confirm it possible use in pulpotomy and regenerative endodontics