Comparative value of microscopy, serology and real time PCR in the diagnosis of asymptomatic canine leishmania infantum infection

Abstract

The sensitivity (SE) of cytological examination of spleen and lymphnode smears by optical microscopy (OM), antibody-ELISA (enzyme-linked immunosorbent assays) and real-time (rt) PCR (polymerase chain reaction), for diagnosing asymptomatic canine Leishmania infantum infection was investigated in 110 apparently healthy dogs from southeast Spain. The percentage of OM, ELISA and rtPCR positive dogs were 2% (2/110), 27% (26/97) y 67% (39/58), respectively, although the percentage of rtPCR-positive dogs were 35-41% in individual tissues and 9% in blood. The estimated SE (95% confidence interval) of OM relative to the rtPCR and ELISA tests was 5% (0-12) and 8% (0-18), respectively. Results confirm that most apparently healthy dogs from L. infantum endemic areas are infected, that approximately only one third of these infected dogs develop antibodies and that very few have parasite loads that are high enough to allow detection by OM. As a result, the degree of agreement between rtPCR, ELISA and OM for L. infantum diagnosis in subclinnically infected dogs is low.

Se investigó la sensibilidad (SE) del examen citológico mediante microscopia óptica (MO) de improntas de bazo y linfonodo, de la prueba de anticuerpos ELISA (inmuno-ensayo ligado a enzima) y de la PCR (reacción en cadena de la polimerasa) a tiempo real (tr), para diagnosticar la infección asintomática por Leishmania infantum en 110 perros aparentemente sanos, del sureste de España. El porcentaje de perros positivos a MO, ELISA y PCRtr fue 2% (2/110), 27% (26/97) y 67% (39/58), respectivamente, aunque el porcentaje de PCR-positivos osciló entre 35-41% para cada tejido individualmente y 9% en sangre. La SE estimada (intervalos de confianza del 95%) de la MO en relación a la PCRtr y al ELISA fue 5% (0-12) y 8% (0-18), respectivamente. Estos resultados confirman que la mayoría de perros aparentemente sanos de una población endémica de L. infantum están infectados, que aproximadamente solo la tercera parte de éstos desarrolla anticuerpos frente al parásito y solo unos pocos tienen suficiente carga parasitaria en tejido linfoide como para ser detectada mediante MO. Consecuentemente, el grado de concordancia de la PCRtr, el ELISA y la MO en el diagnóstico de leishmaniosis canina asintomática es escaso.