Contribución clínica al estudio de biomarcadores del cáncer cutáneo no melanoma

Abstract

INTRODUCCIÓN Existen actualmente diversos sistemas de estadificación para el CEC que utilizan factores clínicos e histológicos para clasificar a los pacientes. Su capacidad para predecir el desarrollo de metástasis puede disminuir en algún perfil de pacientes. De este modo, son necesarios más factores pronósticos para clasificar correctamente a los pacientes con CEC según su pronóstico y subsiguiente manejo en la consulta. El infiltrado inflamatorio asociado a diversos tumores puede tener implicaciones pronósticas y terapéuticas. Existen escasos estudios que evalúen y comparen la composición del infiltrado inflamatorio asociado a otras lesiones queratinocíticas como el queratoacantoma y la queratosis actínica, cuyos resultados han resultado dispares. JUSTIFICACIÓN Y OBJETIVOS Ante la ausencia de datos concluyentes en cuanto a la respuesta inmunitaria asociada a CEC y a otras lesiones queratinocíticas, planteamos un estudio del infiltrado inflamatorio asociado a CEC no metastásico, CEC metastásico, queratoacantomas y queratosis actínicas, mediante el uso de diversos marcadores inmunohistoquímicos de células inmunitarias. De este modo, pretendemos evaluar la repercusión pronóstica del infiltrado inflamatorio en cuanto a CEC y evidenciar si existen diferencias en el mismo entre los tres tipos de lesiones queratinocíticas. MATERIAL Y MÉTODOS Estudio retrospectivo de casos y controles, en pacientes con lesiones cutáneas cancerosa y precancerosa, con un período mínimo de seguimiento de 3 años. Se calculó el tamaño muestral (n) a partir de un estudio piloto inicial. Los pacientes fueron incluidos siguiendo los criterios de inclusión explicados posteriormente. Se disponía de un bloque tumoral en parafina para cada paciente. Se recogieron variables clínicas, demográficas, histológicas y evolutivas de manera retrospectiva y se realizaron estudios inmunohistoquímicos sobre estas muestras (CD8, CD163, CD57, FOXP3 y CD25). Se construyeron tres arrays tisulares, con un foco para cada uno de los bloques donantes. Inicialmente se realizó estadística descriptiva para caracterizar la muestra. También se realizó un análisis univariante, comparando CEC metastásicos y no metastásicos y también comparando CEC, queratoacantomas y queratosis actínicas Asimismo, se realizó un análisis multivariante mediante el modelo de regresión logística. RESULTADOS El tamaño muestral final fue de 146 pacientes. Se encontraron diferencias en cuanto a la edad de pacientes con CEC metastásico, que tenían una edad media mayor que aquellos sin metástasis. El tamaño de los CEC era mayor en aquellos que metastatizaban. También se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos según la localización de la lesión y el espesor tumoral. En el caso de los CEC metastásicos, el 80% de estos reunían criterios para ser etiquetados como CECAR, mientras que tan solo el 24,3% de los CEC no metastásicos los reunían también. En cuanto a la expresión de CD8 (como marcador de linfocitos T citotóxicos), la media de expresión de este marcador fue mayor en CEC no metastásicos que en metastásicos. La expresión media de CD57 (como marcador de células NK) y de CD25 + FOXP3 (células T reguladoras) en pacientes con CEC metastásico fue mayor que en no metastásicos. La media de expresión de CD8 fue mayor en queratosis actínicas que en CEC. La expresión media de CD57 en pacientes con CEC fue mayor que en pacientes queratoacantoma. CONCLUSIONES Tal y como se había observado en estudios previos, la edad, el tamaño tumoral, el espesor tumoral y la localización pueden representar factores pronósticos para el desarrollo de metástasis en CEC. En nuestro estudio también se evidenció que la clasificación de la BWH en CECAR sí tenía validez pronóstica, ya que aquellos pacientes con CEC metastásico eran con más frecuencia CECAR. Aquellos CEC que metastatizaron presentan un infiltrado inflamatorio asociado al tumor (TIL) diferente a aquellos CEC que no metastatizaron, de manera que expresaron menor cantidad de células CD8+, mayor cantidad de células CD57 positivas y de células FOXP3-CD25 positivas. Las queratosis actínicas presentaban mayor porcentaje de células CD8 positivas que el CEC. Las muestras con CEC, por su parte, presentaban mayor expresión de células CD57 positivas que los queratoacantomas

INTRODUCTION There are several staging systems for cSCC that use clinical and histological factors to classify patients. Some profiles of patients can be missclasified with these staging systems. Thus, more prognostic factors are necessary to correctly classify patients with cSCC according to their prognosis and subsequent clinical management. The Tumour-associated inflammatory cell infiltrate can have prognostic and therapeutic implications. There are few studies that evaluate and compare the composition of this infiltrate in other keratinocytic lesions such as keratoacanthoma and actinic keratosis. JUSTIFICATION AND OBJECTIVES In the absence of conclusive data regarding the cSCC immune mediated response, we propose a study of the inflammatory infiltrate associated with non-metastatic cSCC, metastatic cSCC, keratoacanthomas, and actinic keratoses, using some immune cells‘ immunohistochemical markers. This way we intend to evaluate the prognostic impact of the inflammatory infiltrate, and investigate whether there are differences on it between three types of keratinocytic lesions. MATERIAL AND METHODS Retrospective case-control study in patients with cancerous and precancerous skin lesions, with a minimum follow-up period of 3 years. The sample size (n) was calculated from an initial pilot study. All patients were included following the inclusion criteria explained later. One paraffin tumor block was available for each patient. Clinical, demographic, histological and prognostic variables were collected retrospectively and immunohistochemical studies were performed on these samples (using CD8, CD163, CD57, FOXP3 and CD25). Three tissue arrays were constructed, with a focus for each of the donor blocks. Descriptive statistics were initially performed to characterize the sample. An univariate analysis was also performed, comparing metastatic and non-metastatic SCC and also comparing SCC, keratoacanthomas and actinic keratoses. Finally, a multivariate analysis was performed using the logistic regression model. RESULTS The final sample size was 146 patients. Differences were found in terms of the age of patients with metastatic cSCC, who were older than those without metastases. The size of the cSCC was greater in those who metastasized. Statistically significant differences were also found between both groups according to the location of the lesion and the tumor thickness. Regarding the expression of CD8 (as a marker of cytotoxic T lymphocytes), the mean expression of this marker was higher in non-metastatic than in metastatic cSCC. The mean expression of CD57 (as a marker of NK cells) and of CD25 + FOXP3 (regulatory T cells) in patients with metastatic SCC was higher than in non-metastatic patients. The mean expression of CD8 was higher in actinic keratoses than in cSCC. The mean expression of CD57 in patients with CPB was higher than in keratoacanthoma patients. CONCLUSIONS As observed in previous studies, age, tumor size, tumor thickness, and location may represent prognostic factors for the development of metastases in cSCC. In our study, it was also evidenced that the BWH classification in high-risk cSCC did have prognostic validity, since those patients with metastatic CEC were more frequently high-risk. Those SCC that metastasized presented a tumor-associated inflammatory infiltrate (TIL) different from those SCC that did not metastasized, so that they expressed fewer CD8 + cells, more CD57 positive cells and FOXP3-CD25 positive cells. Actinic keratoses had a higher percentage of CD8 positive cells than SCC. The samples with SCC, on the other hand, presented higher expression of CD57 positive cells than the keratoacanthomas.