Evaluación oncológica mediante células tumorales circulantes, PET-TC y AFP de pacientes con hepatocarcinoma sometidos a trasplante hepático

Abstract

Introducción El carcinoma hepatocelular (CHC) es una de las neoplasias malignas más prevalentes en todo el mundo. El trasplante de hígado (TOH) es la mejor opción terapéutica potencialmente curativa en pacientes cirróticos seleccionados (criterios de Milán). Sin embargo, la escasez de donantes alarga el tiempo en la lista de espera y promueve la progresión del tumor. Además, la tasa de recidiva después del TOH es alta, en torno al 10-20%. Hoy en día no existen marcadores eficientes de actividad biológica previa al TOH que puedan predecir la recaída. La determinación de células tumorales circulantes (CTC) en sangre periférica, podría desempeñar un papel importante. El objetivo de este trabajo es determinar el número de CTC en pacientes con CHC incluidos en la lista de espera para TOH, estudiar su posible asociación con los niveles de alfafetoproteína (AFP), captación en el PET-TC y variables clínicas (invasión vascular, tamaño tumoral, tiempo en lista de espera, recidiva, etc) y comparar los niveles de CTC antes del TOH y durante los dos primeros años de seguimiento. Pacientes y método Se obtuvo sangre periférica de 30 pacientes incluidos en lista de espera para TOH y al cabo de 1 y 6 meses, y 1 y 2 años del TOH. La determinación de CTC se realizó a partir de sangre periférica por el método Isoflux, basado en anticuerpos inmunomagnéticos anti-EpCAM y posterior recuento por inmunofluorescencia. Análisis estadístico: se emplearon los test Rho Spearman, U de Mann-Whitney y test de Wicoxon cuando era apropiado (SPSS 22.0; Inc., Chicago, Ill, USA). Resultados Se incluyeron 30 pacientes con CHC dentro de los criterios de Milán. El 90% fueron varones, con una mediana de edad de 57 años. La mediana de seguimiento fue de 57 meses (RI: 45-62). Durante el seguimiento, 4 pacientes (13,3%) presentaron recidiva. A todos los pacientes se les extrajo una muestra sanguínea para la determinación de CTC antes del TOH y en 24 de ellos (80%) se contabilizó al menos una CTC. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los niveles preTOH y los niveles de CTC al año (p=0,018) y a los 2 años (p=0,038). Los niveles de CTC a lo largo del seguimiento en los pacientes con y sin recidiva fueron similares. Los niveles pretrasplante de CTC se asociaron a un mayor tiempo en lista de espera (p=0,002), PET-TC positivo (p=0,024), mayor tamaño tumoral (p=0,001), mayor suma del diámetro de los tumores viables (p=0,006) y presencia de invasión microvascular (p=0,033). En los pacientes con PET-TC positivo fue más frecuente la presencia de invasión microvascular (30% vs 0; p=0,03) y se asoció a mayores niveles de CTC pretrasplante (p=0,028) y mayor suma del diámetro de tumores viables (p=0,034). Los pacientes con recidiva presentaron un SUVmax más elevado (5,2 vs 1,1; p=0,013), mayor tamaño tumoral (5 cm vs 2 cm, p = 0,036), mayor suma de los diámetros de los tumores viables (8,3 cm vs 2,8 cm; p=0,031), mayor frecuencia de invasión microvascular (50% vs 3,8%; p = 0,039), menor supervivencia libre de enfermedad (SLE) (8 meses vs 59,5 meses, p=0,003) y menor supervivencia global (22 meses vs 59,5 meses; p=0,017). Además, se observó una tendencia descendente en los niveles de CTC. La SLE fue menor en pacientes con SUVmáx ≥ 3,5 (p<0,001) y niveles pretrasplante de CTC ≥ 9 (p=0,040). Conclusiones Los niveles de CTC disminuyen significativamente después del TOH. La concentración de CTC en sangre periférica y la captación en el PET-TC en pacientes con CHC sometidos a TOH está asociada con factores de mal pronóstico y a una menor SLE. La determinación de estos marcadores antes del TOH es útil para predecir la recidiva.

Introduction Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most prevalent malignancies worldwide. Liver transplantation (LT) is the best potentially curative therapeutic option in selected cirrhotic patients (Milan criteria). Nevertheless, the shortage of organ donors lengthens the wait time and promotes tumor progression. What is more, the recurrence rate after LT is high, around 10 to 20%. Nowadays, there are not efficient markers of biological pretransplant activity that could predict early recurrence. In this context, the investigation of circulating tumor cells (CTCs) in peripheral blood, also termed liquid biopsy, could play a major role. The aim of this work is to determine the number of CTCs in patients with HCC awaiting for LT, to study its possible association with AFP levels, positivity of PET-CT and clinical variables (vascular invasion, tumor size, waiting list time, post-LT recurrence…) and to compare CTC levels before and after LT (one and six months and one and two years). Patients and method Peripheral blood was obtained from 30 patients on the waiting list for LT and after 1 month, 6 months and one and two years of the LT. CTCs immunomagnetic isolation was performed with anti-EpCAM antibodies by IsoFlux™ system. Statistical analysis: Rho Spearman test, Mann-Whitney U test and Wilcoxon test were used when appropriate (SPSS 22.0; Inc., Chicago, Ill, USA). Results A total of 30 patients with HCC within Milan criteria were included. Ninety percent were male, with a median age of 57 years. The median follow-up was 57 months (IQR: 45-62). During follow-up, 4 patients (13.3%) had a recurrence. A blood sample was taken from all patients for the determination of CTCs before LT, and in 24 of them (80%) at least one CTC was counted. Statistically significant differences were found between the pre-LT levels and the CTC levels at one year (p=0.018) and at 2 years (p=0.038). Throughout follow-up, CTC levels were similar in patients with and without recurrence. Pre-LT levels of CTC were associated with a prolonged waiting time on the list (p=0.002), positive PET-CT (p=0.024), larger tumor size (p=0.001), increase in the sum of the diameters of viable tumors (p=0.006) and presence of microvascular invasion (p=0.033). No significant correlation was found between pre-LT CTC levels and recurrence. In patients with positive PET-CT, the presence of microvascular invasion was more frequent (p=0.03) and was associated with higher levels of pre-LT CTCs (p=0.028) and an increase in the sumsum of viable tumors diameter (p=0.034). Patients with recurrence presented a higher SUVmax (5.2 vs 1.1; p=0.013), larger tumor size (5 cm vs 2 cm, p=0.036), and greater sum of the diameters of viable tumors (8, 3 cm vs 2.8 cm; p = 0.031), higher frequency of microvascular invasion (50% vs 3.8%; p=0.039), lower recurrence-free survival (8 months vs 59.5 months, p = 0.003) and lower overall survival (22 months vs 59.5 months; p=0.017). Also, a downward trend was observed in CTC levels. The recurrence-free survival was lower in patients with SUVmax ≥ 3.5 (p<0.001) and pre-LT CTC levels ≥ 9 (p=0.040). Conclusion CTC levels decrease significantly after LT. CTC levels and PET-CT uptake in patients with HCC undergoing LT is associated with clinical and pathological factors of poor prognosis and lower recurrence-free survival. Therefore, the determination of these markers before transplantation is useful to predict recurrence.