Estudio de la expresión del receptor LAIR-1 en macrófagos humanos. Posible implicación en el desarrollo de cirrosis hepática

Abstract

RESUMEN El primer objetivo de este trabajo fue el estudio bibliográfico del gen LAIR-1, que codifica un receptor inhibidor descrito en fagocitos. Para ello se revisó la bibliografía publicada en revistas de investigación científica, así como las secuencias depositadas en las principales bases de datos biológicos disponibles en la red hasta el momento. Los resultados encontrados revelaron que la información depositada en las bases de datos por los diferentes autores era redundante y presentaba una nomenclatura diferente. Tras estudios de alineamiento con diferentes herramientas informáticas, pudimos establecer las equivalencias entre los datos publicados. De las 4 isoformas descritas, generadas por maduración alternativa del ARN, sólo LAIR-1a y LAIR-1b coincidieron completamente en las bases de datos consultadas. El siguiente objetivo fue el estudio de la expresión del gen LAIR-1 mediante qRT-PCR en macrófagos peritoneales obtenidos del líquido ascítico de pacientes con cirrosis hepática, y su comparación con los obtenidos para macrófagos de sangre periférica de donantes sanos, como población de referencia. Esta patología se asocia a un incremento de mediadores inflamatorios y podría estar relacionada con la desregulación de algunos de los mecanismos de control del sistema inmunitario. La qRT-PCR realizada con los cebadores diseñados para estudiar las isoformas LAIR-1a y -1b, reveló que éstas se expresan en ambas poblaciones de macrófagos. Además, los resultados mostraron que los niveles de expresión para los transcritos que codifican ambas isoformas son menores en la población de macrófagos de pacientes con cirrosis, en comparación con los macrófagos de donantes sanos. Se encontraron además diferencias significativas entre ambas poblaciones de macrófagos en la capacidad de respuesta a estímulos activadores como LPS y C. albicans. Estos resultados podrían contribuir a identificar nuevas dianas terapéuticas o diagnósticas para prevenir el daño hepático.

ABSTRACT Our first goal in this work was the bibliographic study of the gene LAIR-1, which encodes an inhibitory receptor described on phagocytes. To do this, we reviewed the current bibliography from several scientific journals, as well as the sequences that so far now we can find in the main biological databases on the internet. Our results showed that the information available in the different databases was redundant and a different nomenclature was used for unique sequences. Using alignment studies with different bioinformatic tools, we established equivalences between the published data. Taking into account the 4 isoforms described, generated by alternative splicing of the RNA, only LAIR-1a and LAIR-1b matched in the databases reviewed. Our next objective was to study the expression profile of the gene LAIR-1, using qRT-PCR, on peritoneal macrophages obtained from ascitic fluid from patients with hepatic cirrhosis, and compared it with the expression on peripheral blood macrophages from healthy donors, which we used as a referential population. This pathology is related to an increase of inflammatory mediators that could be produced by a dysregulation of some control mechanisms involved in immune response. qRT-PCR performance using specific primers designed for LAIR-1a and -1b, showed that these isoforms were expressed on both macrophage populations. Results also showed significant differences between both macrophage populations in responsiveness to LPS and C. albicans activators. These results may help to identify new prognostic or therapeutic targets to prevent hepatic damage.