Efecto de la testosterona en la espermatogénesis de machos de dorada (Sparus aurata L.)

Abstract

RESUMEN Los andrógenos pueden inducir la espermatogénesis en peces teleósteos inmaduros. Sin embargo, su función no se conoce con exactitud en los ejemplares adultos. Para conocer el efecto in vivo de la testosterona (T) sobre la espermatogénesis de dorada (Sparus aurata L. 1758), especie hermafrodita protándrica de interés económico alto en la región de Murcia, inyectamos un implante (in situ forming microparticle system) a ejemplares que se encontraban en la etapa de involución testicular del segundo ciclo reproductor. Se trabajó con tres grupos de ejemplares: i) inyectados con implantes con 1 mg T/Kg de peso corporal, ii) inyectados con implantes sin T y iii) no inyectados. Se tomaron muestras de sangre, gónada e hígado a los 7, 14, 21 y 28 días después de haberlos inyectado para realizar un análisis hormonal, morfológico, inmunocitoquímico y de expresión génica. El objetivo de nuestro trabajo era determinar el efecto de la T, y de sus derivados, sobre la fisiología de la gónada analizando la progresión de la espermatogénesis, la tasa de proliferación celular y de apoptosis, la presencia de leucocitos y el perfil de expresión de genes relevantes en la respuesta inmunitaria. Los implantes con T provocaron un aumento en los niveles de T, alcanzando niveles supra-fisiológicos. El perfil de expresión génica, en gónada e hígado de algunas enzimas implicadas en la síntesis y el metabolismo de esteroides, descartó la transformación de T en compuestos estrogénicos. Por otra parte la T parece inhibir la respuesta inmunitaria en la gónada ya que observamos una disminución de los niveles de expresión de los genes que codifican para los TLR, lo que podría provocar una disminución de su capacidad para reconocer y responder a los patógenos. Sin embargo se observó un aumento de granulocitos acidófilos y linfocitos lo que nos sugiere que los andrógenos participan en el flujo migratorio de leucocitos al interior de la gónada.

ABSTRACT Androgens can induce complete spermatogenesis in immature or prepubertal teleost fish, however many aspects of the role of androgens in adult teleost spermatogenesis have remained elusive. We have used the an implant (in situ microparticle forming system) of testosterone (T) in a homogenous population of gilthead seabream at testicular involution stage to study in vivo the effects of T on the balance of the steroid hormones and on the physiology of the gilthead seabream gonad. We worked with three groups of specimens: i) injected with 1 mg T/kg body weight, ii) injected with implants without T and iii) non-injected. Blood samples, gonad and liver were taken at 7, 14, 21 and 28 days after they were injected for hormone analysis, and morphological, immunocytochemical and gene expression analysis. The aim of this study was to determine the effect of T, and its derivatives, on the physiology of the gonad analyzing the progression of spermatogenesis, the rate of cell proliferation and apoptosis, the presence of leukocytes and the expression profile of genes important in the immune response. T implants caused increase in the levels of T, reaching supra-physiological levels. The gene expression profile of some steroidogenenic enzymes in liver and gonad ruled out the transformation of T. Moreover, T seems to inhibit the immune response in the gonad as partially impaired the ability to recognize and response to pathogens through down-regulation of several tlr gene expressions. However, there was an increase in the number of the acidophilic granulocytes and lymphocytes suggesting that androgens would also be involved in leukocytes migratory influx.