Diagnóstico de los carcinomas orofaríngeos relacionados con el virus del papiloma humano (VPH) : detección viral mediante técnicas comerciales de uso clínico y análisis de su valor pronóstico

Abstract

Los carcinomas de cabeza y cuello son el sexto tipo más frecuente de cáncer a nivel global. En los último años se ha puesto de manifiesto un incremento en la incidencia de los carcinomas orofaríngeos atribuída a la oncogénesis asociada al virus del papiloma humano (VPH), que muestran características clínicas, morfológicas y pronósticas diferenciales respecto a los tradicionalmente atribuídos al consumo de alcohol y tabaco. Estos carcinomas serían susceptibles de ser tratados con terapias individualizadas que supongan una mejora en la calidad de vida del paciente respecto a la alcanzada con el manejo clínico que se realiza en la actualidad. Sin embargo, el diagnóstico de estos tipos de cáncer presenta dificultades técnicas e interpretativas, y aún no se ha establecido el procedimiento más adecuado para el diagnóstico de este tipo de carcinomas.

En nuestro estudio, realizamos un análisis comparativo de distintas técnicas comerciales de uso clínico en muestras de tejido embebido en parafina de carcinomas orofaríngeos diagnosticados en el Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (HCUVA) (Murcia) entre 2005 y 2016, y evaluamos su valor pronóstico en la detección de carcinomas orofaríngeos relacionados con VPH. En este trabajo consideramos los distintos enfoques diagnósticos posibles, comparando los resultados obtenidos mediante cinco técnicas de detección de ADN de VPH con diferentes dianas biológicas y fundamentos moleculares [HPV Xpert® (Cepheid), Anyplex® II HPV28 Detection (Seegene), CLART® HPV4 (Genomica), INNO-LiPA® HPV Genotyping Extra II (Fujirebio), AmpFire® (Atila Biosystems)], dos técnicas de detección de ARNm viral de las proteínas E6/E7 (PreTect® HPV-Proofer (NorChip) y QuantiVirus® HPV E6/E7 RNA (DiaCarta)] y la detección de la sobreexpresión de p16 mediante tinción inmunohistoquímica.

Nuestro estudio revela que las técnicas evaluadas obtienen resultados concordantes en mayor o menor grado para la detección de VPH, y que podrían ser de utilidad en el diagnóstico de carcinomas orofaríngeos relacionados con VPH. Además, se observa que las técnicas de detección de ADN viral son las que proporcionan un mayor valor pronóstico para este tipo de carcinomas y que la ausencia de sobreexpresión de la proteína p16 se asocia a la negatividad para la detección de VPH. Estos resultados sugieren que se podría realizar un adecuado diagnóstico de los carcinomas orofaríngeos relacionados con VPH mediante un algoritmo en dos pasos en el que se realice, en primer lugar, la detección de la sobreexpresión de la proteína p16, y en caso de ser esta positiva, la detección de ADN de VPH.

Head and neck carcinomas are the sixth most common cancer worldwide. Although these types of cancer are typically associated to alcohol and tobacco exposure, there is an increasing incidence of oropharyngeal cancers attributed to human papillomavirus (HPV) related oncogenesis. HPV-related oropharyngeal carcinomas (OPC) show pathological, clinical, and prognostic differential characteristics, and could benefit from new treatment strategies able to reduce treatment-related toxicity and improve the quality of life and survival of the patients. However, HPV testing for the diagnosis of HPV-associated OPC is still challenging, and at the moment, it has not been established the test or testing algorithms to reliably perform the laboratory diagnosis of this type of carcinomas. In our study, we performed a comparative evaluation of commercial HPV-testing assays in formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) samples from oropharyngeal carcinomas diagnosed at Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (HCUVA) (Murcia, Spain) between 2005-2016, and analyzed their prognostic value. Several diagnostic approaches were considered, comprising five DNA-HPV detection assays covering different biological and molecular targets [HPV Xpert® (Cepheid), Anyplex® II HPV28 Detection (Seegene), CLART® HPV4 (Genomica), INNO-LiPA® HPV Genotyping Extra II (Fujirebio) and AmpFire® (Atila Biosystems)], two viral mRNA E6/E7 detection assays [PreTect® HPV-Proofer (NorChip) and QuantiVirus® HPV E6/E7 RNA (DiaCarta)] and the immunohistochemical detection of p16 overexpression. Our study reveals that the evaluated assays obtain, to different extents, concordant results for HPV-detection, and support their suitability for their use on the diagnosis of HPV-related OPC. Among them, the HPV-DNA detection assays provide a better prognostic value for this type of carcinomas, while the absence of p16 overexpression is associated with the negativity of the HPV-detection assays. These results suggest the suitability of a two-step algorithm for the reliable laboratory diagnosis of HPV-related OPC, consisting on the detection of p16 overexpression followed by HPV-DNA detection.