Calidad seminal, inseminación artificial y crioconservación espermática en el palomo deportivo murciano (Columba livia)

Abstract

El palomo Deportivo Murciano tiene su origen en la llegada de los árabes a la Península hace más de trece siglos, su constante manejo reproductivo en busca de un estándar genético ha permitido mejorar las cualidades de resistencia al vuelo y mantener su comportamiento seductor capaz de conducir a la hembra a su palomar ante la presencia de otros competidores. La población de Palomo Deportivo “Palomo de Pica” en la Región de Murcia permite anillar un promedio de 130.000 palomas al año y como actividad deportiva se realizan campeonatos comarcales, regionales y nacionales, por lo que la Colombicultura es una actividad cultural, deportiva y económica de importancia en el Levante Español. El objetivo general de este trabajo es la conservación ex situ de gametos como una alternativa para preservar material genético de excelente calidad. En nuestro estudio las nuevas técnicas de biotecnología reproductiva asistida se han extrapolado al palomo Deportivo Murciano consiguiendo modificar las metodologías para la extracción de semen. Se han utilizado doce palomos Deportivos de Murcia durante doce meses y catorce palomas durante cinco meses. Con el semen extraído se han realizado las siguientes experiencias: selección del diluyente TALP para valoración y congelación, valoración básica de la calidad seminal, inseminación artificial con semen fresco diluido, comportamiento productivo y reproductivo de la hembra, evaluación de crioprotectores (DMSO, Glicerol, DMA y yema de huevo) y crioconservación de semen. Además, este estudio permitió conocer la variación de la calidad de semen por el efecto de factores externos como temperatura, humedad y horas de luz del día. Los resultados obtenidos fueron analizados mediante la determinación de estadísticos descriptivos, ANOVA (SPSS Statistics V.17) y comparación de medias (t-Student y Duncan) a los niveles de probabilidad de p<0,05 y p<0,01. 2 Del análisis de los resultados, hemos encontrado que el método alternativo para la extracción de semen de palomo Deportivo Murciano tiene una tasa de eficiencia del 84,55% (1.045/1.236). Del total de 1.045 eyaculados efectivos, 988 se encontraron libres de contaminación por heces, ácido úrico o sangre. El diluyente TALP modificado para valoración y crioconservación, formulado en este estudio, se presenta como el diluyente eficaz para el manejo del semen de palomo. La mayor producción de semen se obtuvo durante el mes de mayo (20,36 ± 3,42 μl) y la más baja en agosto (5,34 ± 3,42 μl). La mayor concentración espermática se obtuvo en el mes de abril (8,6x109 esp/ml) y los mejores resultados de motilidad y viabilidad espermática en el mes de diciembre (4,44 ± 0,04 y 88,66 ± 0,44%), respectivamente. La variación anual (mensual y estacional) de producción y calidad de semen se vio afectada por las horas de luz del día, encontrándose coeficientes de correlación significativos (p<0,01) para las variables concentración (r = 0,170), motilidad (r = -0,364), viabilidad (r = -0,505) y efecto de temperatura ambiental sobre la integridad de la membrana celular (r = -0,604; p<0,01). El crioprotector que obtuvo mejores resultados en el proceso de crioconservación espermática fue el DMSO, superando los resultados de la congelación con glicerol y DMA. La viabilidad espermática postdescongelación (4ºC, 7 minutos) fue del 57,08%, con un movimiento progresivo de 3,50. El estudio del ciclo sexual de la paloma, previo a la IA, ofreció un periodo de 11,73 días por ciclo entre la puesta de dos parejas de huevos. El número promedio de oviposiciones por ciclo y paloma fue de 1,05. Finalmente, la tasa de fertilidad en huevos incubados, obtenidos con posterioridad a tres inseminaciones realizadas en días anteriores a la puesta del primer huevo, fue de 51,17%. Con este trabajo se demuestran las posibilidades de congelar el semen de palomo Deportivo Murciano y su conservación ex situ, con la finalidad de cubrir posibles pérdidas por accidente o enfermedad de los palomos de élite existentes en las sociedades de colombicultores.

Murcian Racing pigeon has its origin in the arrival of the Arabs to the Iberian Peninsula more than thirteen centuries ago. Its steady reproductive handling in search of a genetic standard has allowed to improve the flight resistance qualities and to maintain its behaviour, which allows it to lead the female to its dove house in the presence of other competitors. The population of Murcian Racing pigeon in the Region of Murcia allows to fasten with rings an average of 130,000 doves per year. As a sport activity, local, regional and national championships are made. For this reason, Tippler is a cultural, sport and economic activity of importance in Spanish East.

The general objective of this work is the ex-situ conservation of gametes as an alternative to preserve genetic material of excellent quality. In our study, new reproductive biotechnologies have been transferred to Murcian Racing pigeon and the methodologies for semen collection have been modified.

Twelve Murcian Racing pigeons during twelve months and fourteen doves during five months, respectively, have been used. With semen obtained from donors, we have developed different experiments: choose a TALP extender for evaluation and freezing, basic assessment of the seminal quality, artificial insemination with freshly diluted semen, productive and reproductive behaviour of the female, assessment of cryoprotectant (DMSO, Glycerol, DMA and egg yolk) and sperm cryopreservation. In addition, the study has allowed us to know the semen quality variation due to external factors as temperature, humidity and photoperiod.

Results were analyzed by ANOVA (SPSS Statistics V.17) and mean comparisons (t-Student and Duncan) at the probability levels (p< 0.05 and p <0.01).

Our alternative method of semen extraction had an efficiency rate of 84.55% (1.045/1.236). From a total of 1.045 ejaculated, 988 were free of contamination by faeces, uric acid or blood. TALP extender (modified for evaluation and cryopreservation), formulated in this study, appears as an effective extender for pigeon semen manipulation. In May, we obtained the highest semen production (20.36 ± 3.42 µl) and the lowest production was in August (5.34 ± 3.42 µl). A higher sperm concentration was obtained in April (8.6x109 spermatozoa/ml) and the best results of sperm motility and viability were obtained in December (4.44 ± 0.04 and 88.6 ± 0.44%), respectively.

The annual variation (monthly and seasonal) for semen production and quality was affected by photoperiod. Significant correlation coefficients (p <0.01) were found for the variables: sperm concentration (r = 0.170), sperm motility (r = -0.364) and sperm viability (r = -0.505). An effect of environmental temperature was found on sperm cell membrane integrity (r =-0.604; p <0.01).

DMSO was the cryoprotectant that obtained better results in sperm cryopreservation process, compared with the results obtained with glycerol and DMA. Thawing sperm viability (4ºC, 7 min) was 57.08%, with 3.5 of forward motility.

The dove sexual cycle, previous to the AI, resulted a period of 11.73 days for cycle between laying of two couples of eggs. Oviposition average number for cycle and dove was 1.05. Finally, fertility rate found in incubated eggs obtained after three inseminations (the inseminations being made in days previous to the laying of the first egg), was 51.17%.

In this work, we have demonstrated the potential of freezing semen of Murcian Racing pigeon and its ex-situ conservation, with the aim of covering possible losses for accident or disease of the existing pigeons in Tippler societies.