Optimización y mejora de la inseminación artificial en la raza caprina murciano-granadina

Abstract

OBJETIVOS Mejorar la tasa de fertilidad obtenida mediante inseminación artificial en la raza caprina Murciano-Granadina (MG), actuando a nivel del macho cabrío (calidad seminal y edad, congelación espermática) y la hembra (evitar alteraciones tras sincronización de celos y diagnóstico de gestación precoz y fiable) siempre teniendo en cuenta el bienestar animal. METODOLOGÍA Esta Tesis se ha dividido en 6 experimentos Experimento 1: 10 machos cabríos MG. Determinación del tiempo de reacción (TR), capacidad de servicio y la calidad seminal al utilizar como estímulo sexual una hembra, otro macho o un maniquí inanimado. De cada eyaculado obtenido mediante vagina artificial (VA) se evaluó su volumen, la motilidad individual (MI) y el porcentaje de espermatozoides móviles (% MOT). Experimento 2: 18 machos cabríos MG de entre 3 meses y 7 años para estudiar su comportamiento sexual (TR y capacidad de cubrición) y la calidad de su eyaculado. El estímulo sexual utilizado fue siempre una hembra caprina. Recogida mediante VA. Experimento 3: adaptación del protocolo de congelación seminal publicado por Thilmant (1997) a la especie caprina y estudio de 3 diluyentes diferentes. Evaluación subjetiva y mediante CASA de la calidad seminal y la supervivencia espermática durante 5 horas de 78 eyaculados caprinos. Experimento 4: Comparación del daño ocasionado por dos sistemas de sincronización de celos mediante diferente dispositivo intravaginal: Grupo 1 (N= 13) esponja FGA + cápsula 50x 106 UFC de Lactobacillus plantarum (Lp) cepa I1001. Grupo 2 (N= 15) CIDR® de progesterona con la misma cápsula de Lp. Grupo 3 (N=4) esponja de FGA (no cápsula de Lp). Duración tratamiento 11 días. Estudio de tasa de salida en celo, pH vaginal y flujo sanguinolento, células del sistema inmune y tasas de gestación Experimento 5: comparación de tasas de fertilidad de 2 grupos de cabras Grupo tratamiento (N=15) introducción durante 8 semanas una cápsula de Lp, junto con medida del pH vaginal. Sincronización con esponja de FGA durante 6 días. Grupo control (N=15) sincronización con esponja de FGA sin cápsula de Lp. IA a las 48 y 53 horas tras retirar la esponja. Semen congelado según el experimento 3 y diluyente IMIDA. Determinación del porcentaje de fertilidad de ambos grupos mediante ecografía. Experimento 6: se comparó la ultrasonografía intravaginal con la determinación de P4 sérica 21 días post-IA. Determinar qué método proporciona un diagnóstico fiable más temprano. Ecografías intravaginales a 30 hembras cada dos días desde el día 14 al 30 post IA, para visualizar vesícula de gestación. Determinación de P4 se realizó el mismo día de la IA y 21 días después. RESULTADOS Y CONCLUSIONES La recogida de semen de machos cabríos puede realizarse utilizando como estímulo sexual una hembra u otro macho, sin afectar a la calidad seminal ni la libido. La utilización de un maniquí proporcionó menor número de machos que saltan y eyaculan sobre él, mayor TR, menor volumen y concentración espermática. Interesante su estudio junto con algún fluido corporal Los machos cabríos de raza MG menores de un año presentan menor TR y mayor capacidad de servicio que los adultos. Óptima calidad seminal de machos cabríos de entre 6,5 y 8 meses, aunque existe gran variabilidad entre ejemplares. En ensayos in vitro el diluyente IMIDA y el protocolo de congelación de semen Thilmant (1997), son adecuados para la crioconservación seminal en la especie caprina. El uso de esponjas de FGA produjo mayor alteración de la mucosa vaginal, menor tasa de salida en celo y menor fertilidad acumulada que el CIDR®, pero sin diferencias significativas. La introducción del probiótico Lp de forma intravaginal durante 8 semanas no ocasionó diferencias significativas en la tasa de gestación ni en el pH vaginal. Serían interesantes estudios más profundos sobre la microbiota del tracto reproductor de cabras fértiles. La cuantificación de progesterona sérica en día 21 post- IA es eficaz para reconocer hembras vacías, pero ocasiona errores en hembras clasificadas como gestantes. La ecografía transvaginal en día 30 post-IA es un método económico, seguro para el animal y eficaz en el diagnóstico de gestaciones tempranas, por lo que esperar estos 9 días resulta conveniente a la hora de dar un diagnóstico de gestación certero.

OBJECTIVES Improve the fertility rate obtained through Artificial Insemination (AI) in the Murciano-Granadina (MG) goat breed, acting at the level of the male goat (seminal quality and age, sperm freezing) and the female (avoid vaginal alterations after heat synchronization and early and reliable pregnancy diagnosis) always taking into account animal welfare. METHODOLOGY This Thesis has been divided into 6 experiments Experiment 1: 10 MG goats. Determination of reaction time (RT), service capacity and seminal quality when using a female, another male or an inanimate dummy as a sexual stimulus. Ejaculate volume, individual motility (IM) and the percentage of motile spermatozoa (%MOT) were evaluated from each ejaculate obtained by artificial vagina (AV). Experiment 2: 18 MG male goats between 3 months and 7 years old were used to study their sexual behavior (RT and mating capacity) and the quality of their ejaculate. The sexual stimulus used was always a female goat. Collection by AV. Experiment 3: adaptation of the seminal freezing protocol published by Thilmant (1997) to the goat species and study of 3 different extenders. Subjective and CASA evaluation of seminal quality and sperm survival during 5 hours of 78 goat ejaculates. Experiment 4: Comparison of the damage caused by two oestrus synchronization systems using different intravaginal devices: Group 1 (N= 13) FGA sponge + 50x106 CFU capsule of Lactobacillus plantarum (Lp) strain I1001. Group 2 (N= 15) CIDR® of progesterone with the same Lp capsule. Group 3 (N=4) FGA sponge (no Lp capsule). Treatment duration: 11 days. Study of the rate of coming into heat, vaginal pH and bloody discharge, cells of the immune system and pregnancy rates. Experiment 5: comparison of fertility rates of 2 groups of goats Treatment group (N=15) introduction of an Lp capsule for 8 weeks, together with measurement of vaginal pH. FGA sponge synchronization for 6 days. Control group (N=15) synchronization with FGA sponge without Lp capsule. I at 48 and 53 hours after removing the sponge. Frozen semen according to experiment 3 and IMIDA extender. Determination of the fertility percentage of both groups by ultrasound. Experiment 6: intravaginal ultrasonography was compared with the determination of serum P4 21 days post-AI. Determine which method provides an earlier reliable diagnosis. Intravaginal ultrasound scans of 30 females every two days from day 14 to 30 post AI, to visualize the gestation vesicle. P4 determination was performed on the same day as the AI and 21 days later. RESULTS AND CONCLUSIONS The collection of semen from male goats can be done using a female or another male as a sexual stimulus, without affecting seminal quality or libido. The use of a dummy provided a lower number of males that mount and ejaculate on it, higher RT, lower ejaculate volume and sperm concentration. It would be interesting to repeat the study along with some body fluid in order to improve the results. Male goats of the MG breed under one year of age present lower RT and greater service capacity than adults. Bucks between 6.5 and 8 months have an optimal seminal quality, although there is great variability between specimens. In in vitro tests, the IMIDA extender and the semen freezing protocol published by Thilmant (1997) are suitable for seminal cryopreservation in the goat species. The use of FGA sponges produced greater alteration of the vaginal mucosa, lower rate of coming into heat and lower accumulated fertility than CIDR®, but without significant differences. The introduction of the probiotic Lp intravaginally for 8 weeks did not cause significant differences in the pregnancy rate or in the vaginal pH. It would be interesting deeper studies on the reproductive tract microbiota of fertile goats. Serum progesterone quantification on day 21 post-AI is effective in recognizing empty females, but causes errors in females classified as pregnant. Transvaginal ultrasound on day 30 post-AI is an economic method, safe for the animal and effective in diagnosing early pregnancies, so waiting these 9 days is convenient when giving an accurate pregnancy diagnosis.