Person: Mulero Méndez, Victoriano Francisco
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Mulero Méndez, Victoriano Francisco
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Universidad de Murcia. Departamento de Biología Celular e Histología
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- PublicationOpen AccessEfecto de la testosterona en la espermatogénesis de machos de dorada (Sparus aurata L.)(2020-04-13) Sánchez-Hernández, Miriam; Chaves-Pozo, Elena; Cabas, Isabel; García-Alcázar, Alicia; García Ayala, Alfonsa; Mulero Méndez, Victoriano Francisco; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Biología Celular e HistologíaRESUMEN Los andrógenos pueden inducir la espermatogénesis en peces teleósteos inmaduros. Sin embargo, su función no se conoce con exactitud en los ejemplares adultos. Para conocer el efecto in vivo de la testosterona (T) sobre la espermatogénesis de dorada (Sparus aurata L. 1758), especie hermafrodita protándrica de interés económico alto en la región de Murcia, inyectamos un implante (in situ forming microparticle system) a ejemplares que se encontraban en la etapa de involución testicular del segundo ciclo reproductor. Se trabajó con tres grupos de ejemplares: i) inyectados con implantes con 1 mg T/Kg de peso corporal, ii) inyectados con implantes sin T y iii) no inyectados. Se tomaron muestras de sangre, gónada e hígado a los 7, 14, 21 y 28 días después de haberlos inyectado para realizar un análisis hormonal, morfológico, inmunocitoquímico y de expresión génica. El objetivo de nuestro trabajo era determinar el efecto de la T, y de sus derivados, sobre la fisiología de la gónada analizando la progresión de la espermatogénesis, la tasa de proliferación celular y de apoptosis, la presencia de leucocitos y el perfil de expresión de genes relevantes en la respuesta inmunitaria. Los implantes con T provocaron un aumento en los niveles de T, alcanzando niveles supra-fisiológicos. El perfil de expresión génica, en gónada e hígado de algunas enzimas implicadas en la síntesis y el metabolismo de esteroides, descartó la transformación de T en compuestos estrogénicos. Por otra parte la T parece inhibir la respuesta inmunitaria en la gónada ya que observamos una disminución de los niveles de expresión de los genes que codifican para los TLR, lo que podría provocar una disminución de su capacidad para reconocer y responder a los patógenos. Sin embargo se observó un aumento de granulocitos acidófilos y linfocitos lo que nos sugiere que los andrógenos participan en el flujo migratorio de leucocitos al interior de la gónada.
- PublicationOpen AccessAcidophilic granulocytes of the marine fish gilthead seabream (Sparus aurata L.) produce interleukin-1b following infection with Vibrio anguillarum(Springer, 2004) Chaves-Pozo, Elena; García-Castillo, Jesús; Meseguer, José; García Ayala, Alfonsa; Mulero Méndez, Victoriano Francisco; Pelegrín Vivancos, Pablo; Bioquímica y Biología Molecular B e InmunologíaThe fish immune response to Gram-negative bacteria is poorly understood. In this study, we use a monoclonal antibody (mAb) specific to acidophilic granulocytes from the marine fish gilthead seabream (Sparus aurata L.), together with an antiserum specific to interleukin-1b (IL-1b) from this species, in order to investigate whether these cells are involved in the immune response against the pathogenic bacterium Vibrio anguillarum and, in particular, in the production of the pro-inflammatory cytokine IL-1b. We found that gilthead seabream head- kidney, peritoneal exudate and peripheral blood leukocytes accumulated proIL-1b intracellularly when challenged in vitro with V. anguillarum, whereas only peritoneal exudate and blood leukocytes were able to accumulate proIL-1b following infection. Importantly, the blood leukocytes from infected animals that accumulated proIL-1b were shown to be the acidophilic granulocytes. A rapid mobilization of such cells from the head-kidney to the site of inflammation following infection with V. anguillarum was also observed.
- PublicationOpen AccessThe tumor necrosis factor a of the bony fish seabream exhibits the in vivo proinflammatory and proliferative activities of its mammalian counterparts, yet it functions in a species-specific manner(Springer, 2004) García-Castillo, Jesús; Chaves-Pozo, Elena; Olivares, Pedro; Meseguer, José; Mulero Méndez, Victoriano Francisco; Pelegrín Vivancos, Pablo; Bioquímica y Biología Molecular B e InmunologíaInformation on the bioactivities of non-mammalian cytokines is scant due to the lack of the recombinant molecules and specific antibodies. We produced the mature predicted peptide of tumor necrosis factor a (TNFa) from the bony fish gilthead seabream (Sparus aurata L.) (sbTNFa), and its biological role was determined in vitro and in vivo. We first demonstrated by analytical size-exclusion chromatography that sbTNFa is an oligomeric protein but the dimer appears to predominate over the trimeric form, in contrast to mammalian TNFa. Intraperitoneal injection of native sbTNFa resulted in (i) priming of the respiratory burst of the peritoneal exudate and head-kidney (HK) leukocytes, the latter being the bone marrow equivalent in fish; (ii) rapid recruitment of phagocytic granulocytes to the injection site, and (iii) induction of granulopoiesis in the HK. Interestingly, sbTNFa was able to induce a strong proliferation of HK cells in vitro, whereas human TNFa did not. Conversely, sbTNFa was not cytotoxic for murine L929 fibroblasts.
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