Dual-label time-resolved fluoroimmunoassay for simultaneous quantification of haptoglobin and C-reactive protein in meat juice from pigs

Abstract

A new method was developed to simultaneously measure 2 acute-phase proteins (APPs) by time-resolved immunofluorometry. The assay, based on double-label quantification of haptoglobin (Hp) and C-reactive protein (CRP) in meat juice samples from pigs, was constructed by use of a combination of europium and samarium chelate lanthanides as labels. Meat juice samples from 154 pigs were used for analytic and clinical validation of the assay through determination of precision, accuracy, limit of detection, and quantification. The analytic performance of the assay was satisfactory, with good intra-assay and interassay precision and accuracy. The levels of Hp and CRP were increased in the meat juice samples of diseased animals compared with healthy ones. According to the results, higher sensitivity could be achieved if the cut-off values of both proteins were taken into account for clinical relevance rather than used individually. Since the dual assay saved both time and sample, it could be used as a rapid and sensitive screening test in porcine production.

Une nouvelle méthode a été développée pour mesurer simultanément 2 protéines de phase aiguë (APP) par immunofluorométrie en temps résolu. Cette épreuve, basée sur la quantification par marquage double de l’haptoglobine (Hp) et de la protéine C-réactive (CRP) dans des échantillons de jus de viande de porc, a été mise au point en utilisant comme marqueurs une combinaison d’europium et de samarium, des chélates de lanthanides. Des échantillons de jus de viande provenant de 154 porcs ont été utilisés pour la validation analytique et clinique de l’épreuve en déterminant la précision, la justesse, la limite de détection et la quantification. La performance analytique de l’épreuve était satisfaisante, avec une bonne précision et justesse intra- et inter-essai. Les niveaux de Hp et CRP étaient augmentés dans les échantillons de jus de viande des animaux malades comparativement aux animaux en santé. En fonction de ces résultats, une plus grande sensibilité pourrait être obtenue si les valeurs seuils des deux protéines étaient prise en considération pour la signification clinique plutôt qu’utilisée séparément. Étant donné que l’épreuve simultanée permet une économie de temps et d’échantillon, elle pourrait être utilisée comme méthode rapide de tamisage en production porcine.