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    Asociaciones entre la vitamina D y los parámetros reproductivos masculinos
    (Universidad de Murcia, 2019-11-05) Rudnicka, Anna; Chavarro, Jorge E.; Swan, Shanna H.; Torres Cantero, Alberto Manuel; Escuela Internacional de Doctorado
    Introducción: En 2013 se informó de un recuento relativamente bajo de espermatozoides entre jóvenes universitarios del Sureste español. Además, se ha descrito una disminución en la concentración y conteo espermático durante las últimas décadas en el mundo occidental, y una de las causas potenciales podrían ser los cambios en los estilos de vida. Aunque es un tema controvertido, distintos estudios sugieren que la afectación de algunos parámetros seminales, tales como la movilidad o la morfología espermática, podrían estar asociados con niveles bajos de vitamina D. Objetivos: Analizar la asociación entre los parámetros seminales y los niveles séricos de hormonas reproductivas y la vitamina D [25(OH)D] en jóvenes españoles, así como examinar esta asociación en relación con la ingesta dietaria de Vitamina D. Material y método: Este estudio transversal incluye a 198 estudiantes universitarios reclutados entre 2010-2011 en el sur de España, que proporcionaron muestras de sangre, semen y cumplimentaron cuestionarios demográficos y sobre estilos de vida. La calidad del semen se evaluó midiendo el volumen, la concentración, el recuento total, la motilidad y la morfología espermática siguiendo las directrices de la Organización Mundial de la Salud (OMS). Las muestras de suero fueron analizadas para determinar el 25OHD total y las hormonas reproductivas FSH, LH, testosterona, inhibina B y estradiol. Los niveles de vitamina D sérica se agruparon en tres grupos, insuficiencia/deficiencia, adecuada y alto. La ingesta de vitamina D se evaluó mediante un cuestionario específico validado de frecuencia alimentaria. Las asociaciones entre los parámetros espermáticos y los niveles de hormonas reproductivas y la vitamina D se analizaron mediante regresión lineal múltiple y análisis de la covarianza (ANCOVA), ajustándose por posibles factores de confusión y otras covariables importantes. Resultados: Casi todos los varones presentaron niveles adecuados de vitamina D en suero. Sólo 3 varones (1,5%) tenían deficiencia de vitamina D (<30 nmol / L) y el 17% eran insuficientes (<50 nmol / L). Sin embargo, el consumo de vitamina D procedente de la dieta fue relativamente bajo (por debajo de las 600 UI/día recomendadas en el 99% de los hombres). La edad, la actividad física y la ingesta de vitamina D dietaria se correlacionaron con los niveles séricos de vitamina D. Ningún parámetro espermático ni ninguna hormona reproductiva se asoció con los niveles séricos o ingesta dietaria de vitamina D. Discusión: No se observaron relaciones significativas entre la vitamina D y ninguno de los parámetros reproductivos masculinos en nuestra población de estudio. Conclusiones: Nuestros resultado sugieren que los niveles séricos de vitamina D son adecuados en estos varones jóvenes del Sureste español a pesar de la baja ingesta dietaria. Niveles bajos de vitamina D no explican la baja calidad seminal observada en jóvenes varones españoles. ABSTRACT Background: Relatively low sperm count was reported among young Spanish men in 2013. Several potential culprits have been suggested as explanations for reported trends in sperm counts in Western men, including lifestyles. Although controversial, some studies suggest that semen parameters, such as low sperm motility or abnormal morphology, may be associated with low serum vitamin D levels. Objectives: To evaluate associations between semen parameters and reproductive hormones and serum 25-hydroxyvitamin D [25(OH)D) status in young Spanish men and to examine these associations in relation to dietary intake of vitamin D. Materials and Methods: This cross-sectional study includes 198 university students recruited in 2010-2011 in Southern Spain, who provided samples of blood and semen and food frequencies. Semen quality was evaluated by measuring volume, concentration, sperm counts, motility and morphology, according to the WHO guidelines. Serum samples were analyzed for total 25OHD and reproductive hormones, including FSH, LH, testosterone, inhibin B and estradiol. Dietary vitamin D intake was assessed using a validated food frequency questionnaire. Associations with semen quality and reproductive hormones were examined using linear regression and adjusting for potential confounders. Results: Almost all men had adequate levels of serum vitamin D - only 3 men (1.5%) were vitamin D deficient (<30 nmol/L) and 17% were insufficient (<50 nmol/L). However, dietary vitamin D intakes were relatively low (below recommended 600 IU/day in 99% of men). Age, physical activity and vitamin D intake from daily diet were correlated with vitamin D serum levels. Neither dietary intake nor serum vitamin D levels were associated with sperm parameters or reproductive hormones. Discussion: We did not observe an association between vitamin D status and any reproductive parameter in our study population. Conclusions: Our results suggest that serum vitamin D levels are adequate in these young Spanish men in Southern Spain despite a low dietary intake. Low vitamin D does not explain poor semen quality in Spanish young men.
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    Collection, Biobanking and Characterization of Human Tubal and Uterine Fluids for Their Future Use in Assisted Reproductive Technologies
    (Universidad de Murcia, 2020-01-24) Canha Gouveia, Analuce; María Pilar Coy Fuster; Chavarro, Jorge; Latorre Reviriego, Rafael Manuel; Escuela Internacional de Doctorado
    La literatura actual, revisada en el capítulo I, proporciona evidencias crecientes sobre los beneficios potenciales de los fluidos reproductivos femeninos como suplementos para los medios de cultivo de embriones en la especie humana. A partir de esas evidencias, planteamos la hipótesis de que es posible recoger, caracterizar y validar el uso de estos fluidos en la especie humana y almacenarlos en un biobanco que cumpla todas las condiciones sanitarias y los requisitos legales para su uso futuro en investigación biomédica o en ensayos clínicos. Para evaluar la viabilidad de esta hipótesis, se definieron cuatro objetivos principales en esta tesis descritos en el capítulo II. El primero fue el desarrollo de un procedimiento para la recolección de fluido oviductal (FO) y FU humano en pacientes y donantes (Capítulo III). Después de probar varios métodos para la recolección de fluidos uterinos y oviductales humanos, se encontró que el FO humano (FOH) podría recolectarse ex vivo mediante el método descrito previamente por Carrasco et al., 2008 en modelos animales. Sin embargo, no se encontró ningún método o dispositivo en el mercado que permitiera la recolección de FU humano (FUH) in vivo. Por esta razón, se desarrolló un dispositivo novedoso para la recolección de fluidos humanos que ha sido objeto de una solicitud de patente en el presente. El establecimiento de un acuerdo de cooperación con la red de Biobancos en Murcia ha permitido crear la primera colección de biobancos de fluidos reproductivos humanos (Capítulo IV). En este capítulo, se describen el flujo de trabajo y los métodos de manipulación, registro, trazabilidad, transporte y almacenamiento de los fluidos, así como los números y tipos de muestras disponibles en Biobanc-Mur para uso futuro. En el Capítulo V, se seleccionaron un conjunto de parámetros físico-químicos, actualmente utilizados para las certificaciones incluidas en los controles de calidad (CC) requeridos para la venta de medios de cultivo humanos, y se optimizaron los métodos para evaluarlos. En el capítulo VI, se realizó un análisis proteómico de alta resolución de los fluidos del tracto reproductivo femenino durante la fase secretora del ciclo menstrual, lo que constituye una contribución novedosa al conocimiento del proteoma oviductal y uterino. El conjunto de muestras evaluado, de solo 3 individuos, fue muy valioso en comparación con otros estudios porque fue posible analizar los fluidos reproductivos y el plasma de las mismas mujeres, evitando el sesgo debido a la variabilidad individual. Los estudios anteriores se han centrado en FUH, pero nuestro estudio demuestra que FOH también es un líquido rico en proteínas esenciales que podrían ser un objetivo para mejorar las tasas de fecundación y el desarrollo temprano del embrión si se utilizan en los medios de cultivo. Se necesitan más estudios con diseños similares y con procedimientos operativos estándar establecidos para corroborar nuestros resultados / hipótesis y encontrar marcadores consistentes en las secreciones del tracto reproductor femenino. Por otro lado, establecer correlaciones entre la demografía y el estilo de vida de los donantes con sus resultados de FIV es de gran utilidad para los usuarios. Una mejor comprensión de la dinámica folicular y la respuesta ovárica a la estimulación con gonadotropina de los donantes podría optimizar el reclutamiento del donante y los tratamientos de FIV en el futuro. Por lo tanto, en el capítulo VII, se estudiaron las características demográficas y de estilo de vida en relación con la respuesta ovárica a la hiperestimulación entre las donantes de ovocitos y se encontraron evidencias de que algunos factores clave y potencialmente modificables pueden afectar los rendimientos de ovocitos en mujeres jóvenes sanas. Específicamente, encontramos que las mujeres con un índice de masa corporal (IMC) en el extremo superior del IMC normal, así como las mujeres con un IMC en el rango de sobrepeso, tenían un mayor rendimiento de ovocitos MII. Además, las mujeres que tomaron siestas que duraron más de 30 minutos tuvieron un mayor rendimiento de ovocitos, mientras que las mujeres que hicieron ejercicio durante al menos 5 horas cada semana tuvieron un rendimiento de ovocitos más bajo que las mujeres que no tomaron siestas y las mujeres que no hicieron ejercicio, respectivamente. En resumen, se lograron varios hitos importantes dentro de esta tesis: i) el desarrollo de un dispositivo para recolectar el fluido uterino humano in vivo; ii) La creación del primer biobanco de fluidos reproductivos humanos. La conciencia de la población sobre este biobanco y su impacto en las parejas infértiles puede contribuir para obtener más donaciones de donantes sanos; iii) el establecimiento de los rangos de seguridad para los parámetros utilizados para certificar la calidad de los fluidos reproductivos humanos almacenados en el biobanco; y iv) el análisis epidemiológico y proteómico de los fluidos reproductivos humanos, cuyas conclusiones resultantes permitirán mejorar el conocimiento sobre los componentes de los fluidos reproductivos y elaborar un método para utilizarlos como suplementos para los medios de cultivo de embriones. En conjunto, la estrategia desarrollada en esta tesis podría contribuir a prevenir alteraciones epigenéticas y mejorar la salud de la descendencia derivada de las TRA mediante sistemas de cultivo más naturales durante el desarrollo de embriones preimplantacionales in vitro.
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    Determinantes de los parámetros reproductivos en varones universitarios sanos
    (Universidad de Murcia, 2018-10-22) Adoamnei, Evdochia; Mendiola Olivares, Jaime; Torres Cantero, Alberto Manuel; Escuela Internacional de Doctorado
    INTRODUCCIÓN: Los compuestos disruptores endocrinos son tóxicos medioambientales ubicuos con posibles efectos sobre la función reproductiva masculina. El bisfenol A (BPA) es ampliamente utilizado en la fabricación de plásticos policarbonatos y empaquetados alimentarios. Los parabenos son sustancias que se añaden a productos de uso personal y alimentos como preservantes antimicrobianos. Los filtros ultravioletas (UV) tipo benzofenonas (BP) se utilizan en cremas de uso personal o protectores solares. La exposición a estos compuestos es común entre las poblaciones estudiadas a nivel mundial (>80%), y se ha visto que podrían tener efectos estrogénicos o anti-androgénicos. Sin embargo, existen pocos trabajos que hayan estudiado las relaciones entre la exposición a BPA, parabenos y filtros UV tipo BP y los parámetros reproductivos en hombres no seleccionados por su función testicular. El objetivo de esta Tesis fue evaluar las asociaciones entre las concentraciones urinarias de BPA, parabenos y filtros UV tipo BP y la calidad seminal y niveles de hormonas reproductivas en varones jóvenes. MATERIAL Y MÉTODO: Se llevó a cabo un estudio transversal con una muestra de 215 varones universitarios (18-23 años) de la Región de Murcia entre 2010 y 2011. El mismo día de la exploración física, los sujetos proporcionaron una muestra de orina, semen y sangre y cumplimentaron cuestionarios sobre hábitos de vida. Los compuestos medioambientales se midieron en orina después de tratar las muestras mediante microextracción dispersiva líquido-líquido y analizarlas por cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas en tándem. La calidad seminal se evaluó analizando el volumen, la concentración, el recuento total, la movilidad y la morfología espermática. Se determinaron los niveles séricos de la hormona folículo-estimulante (FSH), hormona luteinizante (LH), testosterona (T) total y libre, estradiol (E2) e inhibina B. Se utilizó la regresión linear múltiple para evaluar las asociaciones entre los distintos compuestos químicos ambientales y los parámetros seminales y niveles hormonales tras ajustar por potenciales variables confundidoras. RESULTADOS: En los modelos multivariantes se halló una asociación positiva significativa entre las concentraciones urinarias de BPA y los niveles séricos de LH (β = 0,07; IC95%: 0,02; 0,12, p-valor <0,01). Las concentraciones de BPA también se asociaron significativa e inversamente con la concentración espermática (β = − 0,04; IC95%: − 0.07; − 0.02, p-valor<0,01) y el recuento total espermático (β = − 0,05; IC95%: − 0,08; − 0,02, p-valor<0,01). No se observaron relaciones significativas entre el BPA y otros parámetros seminales u hormonales. No se hallaron asociaciones significativas entre las concentraciones urinarias de parabenos o su suma molar y ninguno de los parámetros seminales u hormonas. Se encontró una relación positiva significativa entre las concentraciones urinarias de filtros UV tipo BP-1 y BP-3 y los niveles de FSH (β=0,08; IC95%: 0,009; 0.15 y β=0,04; IC95%: 0,0002; 0,08, respectivamente). Las concentraciones de filtros UV tipo BP-1 también se asociaron positiva y significativamente con el cociente T/E2 (β=0,04; IC95%: 0,002; 0,07) y negativamente con el cociente inhibina B/FSH (β=−0.11; IC95%: −0,21; −0,006). No se observó ninguna otra relación significativa entre el resto de filtros UV tipo BP y otros parámetros seminales u hormonales. CONCLUSIONES: Nuestros resultados apoyan la hipótesis de que la exposición a BPA se asocia con una reducción de la capacidad de las células de Leydig (niveles elevados de LH) y un recuento espermático disminuido. Las concentraciones urinarias de parabenos podrían no tener un efecto adverso sobre los parámetros reproductivos en varones jóvenes. Hasta ahora, las evidencias de una asociación entre la exposición a parabenos y el potencial de fecundidad masculino son limitadas. Por último, nuestros resultados sugieren que, en hombres jóvenes, las concentraciones urinarias de filtros UV tipo BP se asociaron con una alteración moderada de algunos niveles hormonales, pero los efectos que se observan sobre la función reproductiva podrían ser menores y con una significación clínica incierta. Son necesarios más estudios para confirmar y ampliar estos hallazgos en otras poblaciones de varones. BACKGROUND: Endocrine Disrupting Chemicals are pervasive environmental toxicants with potential male reproductive function effects. Bisphenol A (BPA) is widely used in industry and commerce to manufacture polycarbonate plastics and food packaging components. Parabens are a group of alkyl esters of p-hydroxybenzoic acid that are commonly added to personal care products, and food processing as antimicrobial preservatives. Benzophenone (BP)-type ultraviolet (UV) light filters are chemicals coming from different sources generally added to personal care products and sunscreens. Exposure to these chemicals is common among the general population, with detectable concentration in more than 80% of study participants, and have been reported to have estrogenic or anti-androgenic effects. However, studies exploring associations between exposure to BPA, parabens and BP-type UV filters and reproductive parameters in men non-selected for testicular function or unaware of their fecundity are very scarce. The objective of this Thesis was to assess the relationships between urinary BPA, parabens and BP-type UV filters concentrations and semen quality and serum reproductive hormone levels in young men. MATERIAL AND METHODS: The Murcia Young Men’s Study (MYMS) is a cross-sectional study of university students 18-23 years old in the Murcia Region. A total of 215 students agreed to participate and completed the study visit between October 2010 and November 2011. All subjects provided urine, blood serum and semen samples on a single day. Environmental chemical concentrations were measured by dispersive liquid–liquid microextraction and ultrahigh performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry detection in urine. Semen quality was evaluated by measuring volume, concentration, motility, morphology and total sperm count. Serum samples were analyzed for reproductive hormones, including follicle-stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH), total and free testosterone (T), estradiol (E2) and inhibin B. Relationships between urinary concentrations of BPA, parabens and BP-type UV filters and semen quality parameters and reproductive hormone levels were examined using multiple linear regression, adjusting for potential confounders. RESULTS: After adjustment for important covariates, there was a significant positive association between urinary BPA concentrations and serum LH levels (β = 0.07, 95%CI: 0.02; 0.12, p-value <0.01). Urinary BPA concentration was also significantly and inversely associated with sperm concentration (β = − 0.04, 95%CI: − 0.07; − 0.02, p-value<0.01) and total sperm count (β = − 0.05, 95%CI: − 0.08; − 0.02, p-value<0.01). No significant associations were found between BPA and other semen parameters or reproductive hormone levels. Urinary concentrations of parabens or their molar sum were not significantly associated with any semen parameters or reproductive hormone levels. There was a significant positive association between urinary BP-1 and BP-3 concentrations and serum FSH levels (β=0.08, 95%CI: 0.009; 0.15 and β=0.04, 95%CI: 0.0002; 0.08, respectively). Urinary BP-1 concentration was also significantly positively associated with T/E2 (β=0.04, 95%CI: 0.002; 0.07) and negatively with inhibin B/FSH (β=−0.11, 95%CI: −0.21; −0.006) ratio. No significant associations were found between other urinary BP-type UV filters and other reproductive hormone levels or any semen parameters. CONCLUSIONS: Our data support the hypothesis that exposure to BPA is associated with a reduction in Leydig cell capacity (increased LH levels) and decreased sperm count. Urinary concentrations of parabens in young men may not adversely impact reproductive function. So far, limited to no evidence of an association between concurrent urinary parabens and male potential fecundity has been found. Lastly, our results suggest that, in young men, urinary BP-type UV filters may be associated with a modest alteration of some reproductive hormones, but the effects we report on reproductive function are likely to be small, and of unclear clinical significance. Further research is needed to replicate these findings in other male populations
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    Distancia anogenital y cociente 2D/4D como biomarcadores androgénicos prenatales y su asociación con el cáncer de próstata e hipogonadismo
    (Universidad de Murca, 2025-11-05) Marín Martínez, Florencio Manuel; Arense Gonzalo, Julián Jesús; Mendiola Olivares, Jaime; Sin departamento asociado; Escuelas::Escuela Internacional de Doctorado
    The anogenital distance (DAG) and the ratio between the lengths of the second and fourth fingers of the hand (2D/4D) are sexually dimorphic characteristics in placental mammals. Both measures are determined in utero, during pregnancy and remain stable throughout development. DAG and 2D/4D have been associated with various diseases, including hypogonadism and hormone-dependent neoplasms, such as prostate cancer (CaP). This type of cancer is frequently diagnosed in men worldwide and is a leading cause of cancer mortality. Testosterone and androgen receptors play a crucial role in its development. Objectives: analyze the relationship between DAG and the risk of developing prostate cancer and late-onset hypogonadism. Also, the relationship between the 2D/4D ratio and the risk of developing prostate cancer and biochemical hypogonadism. Method: A case-control study was conducted with incident cases of CaP. We prospectively evaluated 217 male patients undergoing transrectal prostate biopsy at the Reina Sofía University General Hospital in Murcia between August 2019 and August 2021 due to elevated prostate-specific antigen (PSA ≥ 3 ng/dl) and/or suspicious digital rectal examination (TR). All biopsies and measurements of DAG, second finger (2D), and fourth finger (4D) were performed by four urology residents guided by a supervising urologist. The diagnosis of CaP and hormonal measurement were performed according to the recommendations of the European Association of Urology (EAU) guidelines. Results: In this study, CaP cases presented shorter measures of anopenile DAG (DAGap) and anoscrotal DAG (DAGas) than controls (118.48 mm vs 136.98 mm; p<0.001); (30.58 mm vs 43.85 mm; p<0.001), with a significant association in the ANCOVA model in both unadjusted and fully adjusted models. Late-onset hypogonadism (HIT) was diagnosed in 29% of the participants and showed a shorter DAG compared to men without HIT, with a DAGap of 116.31 mm (9.01 mm) versus 128.81 mm (11 mm), and an DAGas of 29.43 mm (7.91 mm) versus 40.16 mm (11.84 mm); both with p<0.05. The ANCOVA test showed a significant association between the presence of HIT and both DAG measurements. Additionally, DAG measurements demonstrated adequate accuracy for the diagnosis of HIT. There are no significant differences in the 2D/4D ratios of patients with and without CaP [0.9529 mm (0.05 mm) vs 0.9532 mm (0.068 mm)]. It also does not increase the risk of having it. We did not find a significant linear association between serum testosterone levels and the 2D/4D ratio (-0.019; p = 0.82) nor an association with the 2D/4D ratio. The present study suggests that weak prenatal androgen signaling, represented by a shorter DAG, may be associated with an increased risk of CaP and HIT. It is important to highlight that both DAG measurements demonstrated high accuracy in diagnosing HIT, with DAGap showing a superior predictive value for distinguishing the diagnosis. Our analysis does not confirm the association between the 2D/4D ratio, CaP, or testosterone levels. High 2D/4D ratios represent a marker of low fetal androgen exposure. Therefore, hormonal activity early in development could affect the later risk of CaP and testosterone levels, so we cannot rule out that possibility.
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    Eficacia de la terapia con antioxidantes ácidos grasos omega-3 y combinados en el varón subfértil con astenospermia idiopática que precisa de técnica de reproducción asistida
    (2016-06-15) López Martínez, Consuelo; López López, Eugenio; Nieto Díaz, Anibal; Escuela Internacional de Doctorado
    Objetivos: Valorar si los antioxidantes orales administrados a varones subfértiles con astenospermia idiopática son eficaces para mejorar los parámetros seminales y las tasas de embarazo tras realizar Técnicas de Reproducción Asistida (TRA), bien IAC ó ICSI. - Principales: valoración de parámetros clínicos: tasa de recién nacido vivo sano (RNVS), nacido viable, embarazo clínico y bioquímico. - Secundarios: valoración de parámetros seminales, concentración y movilidad progresiva espermática. Valoración de parámetros de laboratorio ovocitarios y embrionarios. Valoración de efectos adversos medicamentosos y gestacionales (tasa de aborto). Metodología: Estudio clínico realizado en 179 parejas estériles con indicación de TRA (IAC ó ICSI), únicamente por causa masculina: astenospermia idiopática leve o severa. Se efectuaron 259 ciclos de TRA: 162 de ICSI y 97 de IAC. Estudio clínico abierto, prospectivo, randomizado, doble ciego y unicéntrico. Se analizan tres grupos de estudio: A) control o no tratamiento del varón (129 ciclos). B) antioxidante único (AU) ácido graso omega 3 (59 ciclos). C) antioxidantes combinados (AC) (71 ciclos). Total con antioxidantes, 130 ciclos A los varones con astenospermia idiopática leve se les indicó IAC y en los casos severos, se realizó ICSI. La duración media del tratamiento antioxidante osciló entre 120 y 135 días en todos los grupos. Las dosis fueron las indicadas por el laboratorio. La duración total de estudio fue de 3 años. Resultados: A) En astenospermia idiopática leve que precisa de IAC. Se observó una mejoría significativa en la movilidad progresiva espermática, en todos los grupos. Al comparar AU con AC, la movilidad fue superior con AC, pero no significativo (NS). La tasa de embarazo bioquímico fue significativamente superior con AC, así como las tasas de embarazo clínico y de recién nacido vivo sano (RNVS), pero estas no fueron significativas (NS). Observamos una elevada tasa de aborto en el grupo de AC, aunque NS. B) En astenospermia idiopática severa que precisa de ICSI. Se observó también una mejoría significativa en la movilidad en todos los grupos. Al comparar AU con AC, la movilidad fue superior con AC, aunque NS. La tasa de embarazo bioquímico fue significativamente superior tanto con AU como con AC, comparando con el grupo control. La tasa de embarazo clínico y de RNVS fueron superiores con AU, pero NS, debido a la elevada tasa de aborto observada con AC. Conclusiones: 1. La tasa de recién nacido vivo sano aumenta con la toma de antioxidantes tanto único como combinados comparado con los controles, sin embargo, este aumento no es significativo. 2. La tasa de embarazo bioquímico aumenta significativamente con la toma de antioxidantes tanto único como como combinados comparado con los controles tanto en astenospermia leve (IAC) como severa (ICSI). 3. No se puede concluir nada significativo respecto a las modificaciones en la concentración y en la motilidad progresiva espermática después de la toma de antioxidantes en varones con astenospermia leve ni en los casos severos. Únicamente observamos un aumento importante de la movilidad tras tratamiento, sobre todo con antioxidantes combinados. 4. Se observa una elevada tasa de aborto únicamente en embarazos conseguidos con antioxidantes combinados, en todos los casos de astenospermia idiopática, tanto en IAC como en ICSI, pero este hallazgo no ha sido significativo. Objectives: Assessing whether oral antioxidants administered subfertile men with idiopathic astenospermia are effective in improving semen parameters and pregnancy rates after performing Assisted Reproduction Techniques (ART) or IAC or ICSI. - Primary outcomes: Assessment of clinical parameters: rate of newborn healthy living (NWR), born feasible, clinical and biochemical pregnancy. - Secondary outcomes: Assessment of laboratory parameters: oocyte and embryo. Assessment treatment and pregnancy (micarriage rate) side-effects. Methodology: Clinical study in 179 infertile couples indicating TRA (IAC or ICSI), only the male cause: mild to severe idiopathic astenospermia. 162 ICSI and 97 of IAC: 259 ART cycles were performed. Open, prospective, randomized, double-blind, single-center clinical trial. Three study groups are analyzed: A) no treatment control or male (129 cycles). B) only antioxidant (AU) omega 3 fatty acid (59 cycles). C) antioxidants combined (AC) (71 cycles). Total antioxidant, 130 cycles. A men with mild idiopathic astenospermia were instructed IAC and in severe cases, ICSI was performed. The average duration of antioxidant treatment ranged between 120 and 135 days in all groups. The doses were as indicated by the laboratory. The total duration of the study was 3 years. Results: A) In mild idiopathic astenospermia that requires IAC. A significant improvement in sperm progressive motility in all groups was observed. AU comparing with AC, mobility was higher with AC, but not significant (NS). Biochemical pregnancy rate was significantly higher with AC and clinical pregnancy rates and live healthy newborn (NWR), but these were not significant (NS). We observed a high rate of abortion in the AC, but NS. B) In severe idiopathic astenospermia that requires ICSI. A significant improvement in mobility in all groups was also observed. AU comparing with AC, mobility was higher with AC, although NS. Biochemical pregnancy rate was significantly higher both as AC AU, compared to the control group. The clinical pregnancy rate and NWR were higher with AU, but NS, due to the high rate of abortion observed with AC. Conclusions: 1. Live healthy newborn rate increases with intake of antioxidants both unique and combined compared with controls, however, this increase is not significant. 2. The rate of biochemical pregnancy increases significantly with taking antioxidants combined both unique and as compared with controls both mild astenospermia (IAC) and severe (ICSI). 3. There can be no conclusion regarding significant changes in sperm concentration and progressive motility after taking antioxidants in men with mild astenospermia or in severe cases. Only observed a significant increase in mobility after treatment, especially combined with antioxidants. 4. A high rate of abortion is observed only in pregnancies achieved with combined antioxidant in all cases of idiopathic asthenospermia, both IAC and ICSI, but this finding has not been significant.
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    Estudio de POMZP3 y sus polimorfismos como potenciales indicadores de fertilidad de la especie humana
    (Universidad de Murcia, 2024-06-25) Almunia Santiago, Nuria; Avilés Sánchez, Manuel; Gómez Sánchez, Emilio; Escuela Internacional de Doctorado
    • Antecedentes y objetivos: El éxito de un tratamiento de fecundación in vitro(FIV) depende de numerosos factores, como un entorno de incubación óptimo, una evaluación embrionaria precisa y un endometrio receptivo. La transferencia de un único embrión es cada vez más común en los laboratorios de FIV para evitar el riesgo de embarazos múltiples, lo que hace aún más importante la elección del embrión óptimo. Con la incorporación de nuevas técnicas de reproducción asistida, en particular de carácter genético, se persigue reducir la pérdida embrionaria y/o gestacional para conseguir antes el objetivo, un recién nacido sano. En esta tesis se han investigado los polimorfismos presentes en el gen POMZP3 y sus posibles variantes en la población de donantes de ovocitos y varones de tratamientos de ovodonación, a fin de determinar si éstos pudieran tener una correlación con la calidad de los ovocitos, el desarrollo embrionario y el éxito de la gestación, con el objetivo de establecer un biomarcador con aplicación potencial en los ciclos de TRA del programa de ovodonación. Otro de nuestros objetivos fue analizar la presencia de la proteína codificada por el gen POMZP3 y sus variantes en ovocitos, células del cúmulo ovígero y medio de cultivo donde se ha producido la FIV. Por último, intentamos producir la proteína POM-ZP3 recombinante en dos tipos de células de mamíferos. • Métodos: Se ha realizado el análisis de polimorfismos de POMZP3 mediante la obtención de ADN genómico a partir de muestras obtenidas de hisopos bucales por amplificación de regiones de interés de ADN genómico de POMZP3.El estudio proteico ha sido abordado mediantetécnicas inmunohistoquímicas, electroforesis en SDS-PAGE y Western blot, así como transfección de células CHO y células HEK293 con POM-ZP3, para profundizar en el estudio funcional de esta proteína. Los datos de desarrollo embrionario fueron integrados en un sistema de inteligencia artificial (IA), junto con otros datos relativos al ciclo reproductivo de los pacientes. • Resultados A través de técnicas de secuenciación se han investigado los polimorfismos de POMZP3 y sus variantes, identificado 9 isoformas, de las cuales una de ellas no se encuentra en homocigosis en la población. Este hecho, pudiera estar relacionado con la muerte temprana del embrión y por tanto servir comobiomarcador potencial de infertilidad. Los datos extraídos de desarrollo embrionario, morfocinética y resultados de los ciclos de pacientes que presentaron este polimorfismofueron procesados por inteligencia artificial revelando que no existen diferencias significativas entre ellos, exceptuando t2 más lentos y divisiones embrionarias ligeramente más rápidas en el grupo donde ambos progenitores presentaban el polimorfismo en heterocigosis. Hemos demostrado in silico la presencia de POM-ZP3 de forma consistente en todas las etapas de desarrollo embrionario hasta mórula, y en células de cúmulo, excepto en blastocisto. La proteína codificada por el gen POMZP3 se ha identificado en el ovocito humano y en las células del cúmulo ovígero. Además, se han detectado diferentes variantes de esta proteína. También se ha identificado la proteína codificada por POMZP3 y sus variantes en el medio de cultivo donde ha tenido lugar la fecundación in vitro. Este hecho implica el efecto potencial de esta proteína en el proceso de la fecundación. Por último,se ha conseguido producir dos proteínas recombinantes, variantes canónica y truncada, de POMZP3 en células de mamífero que permitirán realizar estudios funcionales para conocer su impacto en la fecundación. El análisis de POMZP3 y sus variantes puede ser un marcador útil no invasivo que permita una mejor asignación de donantes de ovocitos y espermatozoides a las parejas aumentando la tasa de éxito de los tratamientos de FIV.
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    Factores que afectan al proceso de criopreservación de los espermatozoides humanos
    (2013-10-04) Martínez Soto, Juan Carlos; Gadea Mateos, Joaquín; Departamento de Fisiología
    En la presente tesis doctoral abordamos el estudio de diversos factores tanto extrínsecos como intrínsecos que afectan al proceso de criopreservación espermática. Entre los factores extrínsecos evaluados observamos que un protocolo de descongelación alternativo provoca mejoras en la funcionalidad de los espermatozoides. De igual modo la adición del antioxidante genisteína al medio de descongelación ocasiona una ligera mejoría en la motilidad así como una menor fragmentación de ADN, a la vez que modula el proceso de capacitación espermática. Por otra parte encontramos que la composición de ácidos grasos tanto en espermatozoides como en plasma seminal está estrechamente relacionada con la calidad seminal, antes y después del proceso de congelación-descongelación. La composición en ácidos grasos de la muestra junto con la capacidad antioxidante del plasma seminal pueden ser factores pronósticos del éxito de la criopreservación espermática Palabras clave: Espermatozoide, Criopreservación, antioxidantes, fragmentación de ADN, generación ROS, desorden lipídico. Summary In the current study we analyzed several factors related to the success in the freeze-thawing sperm procedure. Extrinsic factors as thawing methodology and addition of the antioxidants substance as genistein to the media had a positive effect on the sperm functionality. Some improvement were detected in motility parameters and decrease the membrane lipid disorder and DNA damage in sperm after freeze thawing process. Finally, we analyzed the relationships between the fatty acid composition of human spermatozoa or seminal fluid and total antioxidant capacity in seminal plasma before freezing with sperm quality before and after freezing-thawing. These factors could be used as predictors of the capacity of sperm cryopreservation. Keywords Spermatozoa, cryopreservation, antioxidant, DNA fragmentation, ROS generation, lipid disorder
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    Risk factors associated with the alteration of human semen quality = Factores de riesgo asociados a la alteración de la calidad seminal humana
    (2012-06-01) Mínguez Alarcón, Lidia; López Espín, José Juan; Mendiola Olivares, Jaime; Torres Cantero, Alberto Manuel; Facultad de Medicina
    Entre 2010 y 2011 se realizó un estudio con jóvenes universitarios en Murcia con el propósito de estudiar la epidemiología de la calidad seminal humana. Para ser incluidos en el estudio, los sujetos tenían que ser estudiantes universitarios de la Región de Murcia, habiendo nacido en España después de 1987 y pudiendo contactar con su madre para rellenar un cuestionario. Los jóvenes universitarios presentaron una menor concentración y recuento total espermático comparado con los sujetos de un estudio de Almería en 2001. En la población de estudio, se encontró una asociación positiva entre la ingesta de antioxidantes y parámetros seminales. Se usaron datos de un estudio de casos y controles previamente realizado para explorar la asociación entre metales pesados y calidad seminal en hombres que acudían a clínicas de infertilidad. No se encontró correlación entre la concentración de ninguno de los metales pesados medidos en sangre total, plasma sanguíneo y plasma seminal. Between 2010 and 2011, a study with young university students with the purpose to study the epidemiology of human semen quality was conducted in Murcia. To be included in the study, subjects had to be university students of the Murcia Region, been born in Spain after December 31, 1987, and able to contact their mother and ask her to complete a questionnaire. Young university students presented significantly lower sperm concentration and total sperm count than those found in a study conducted in Almeria in 2001. A positive association has been found between the dietary intake of antioxidant nutrients and determined semen parameters in the study population. Data from a previous case-control study was used to explore the association between heavy metals and semen quality in men attending infertility clinics. There was no correlation between the concentrations of any of the metals in whole blood, blood plasma and seminal plasma.