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Repositorio Institucional de la Universidad de Murcia

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    Advances in the epidemiology of leishmaniosis in animals and humans: genetic diversity of "Leishmania infantum", exposure to "Phlebotomus perniciosus" vector and coinfections with other pathogens
    (Universidad de Murcia, 2021-12-21) Ortuño Gil, María; Berriatua Fernández de Larrea, Eduardo; Bernal Gambín, Luis Jesús; Escuela Internacional de Doctorado
    Las enfermedades vectoriales son cada vez más importantes y afectan a humanos y animales en todo el mundo. Esta tesis doctoral investiga aspectos epidemiológicos de la leishmaniosis y flebovirosis, transmitidas por flebotomos, y la babesiosis y hepatozoonosis, transmitidas por garrapatas, en perros, gatos, fauna silvestre y humanos del sur de España. El Capítulo 1 estudia la prevalencia, asociaciones y características clínicas de la infección por Leishmania infantum, Hepatozoon spp. y Babesia spp. en 212 gatos y 82 perros del sudeste de España. Se detectó ADN de L. infantum en perros (44%) y gatos (21%), Hepatozoon canis en perros (13%), y Babesia vogeli en un perro. Las especies de Hepatozoon fueron idénticas a las de fauna silvestre. El Capítulo 2 estima la prevalencia y asociaciones entre L. infantum, Hepatozoon spp. y Babesia spp. en 151 animales silvestres. Se encontró H. canis en zorros (91%) y garduñas (13%), Hepatozoon martis en garduñas (81%), gatos monteses (20%) y tejones (13%), Hepatozoon felis en gatos monteses (60%), Babesia vulpes en zorros (64%), Babesia sp. tipo A en tejones (58%) y Babesia sp. en gatos monteses (20%). Además, se detectó L. infantum en zorros (29%), garduñas (13%), tejones (8%) y uno de tres meloncillos. Por primera vez, se detectó H. martis en tejones y gatos monteses y H. canis en garduñas a nivel mundial, y Babesia sp. en gatos monteses en España. También detectamos Sarcocystis sp. en una gineta y Cytauxzoon sp. en un gato montés. La fauna silvestre infectada por L. infantum fue más propensa a infectarse con Hepatozoon y Babesia. El Capítulo 3 investiga por primera vez el grado de exposición de humanos hemodonantes al vector Phlebotomus perniciosus midiendo su respuesta serológica al homogenado de glándulas salivares (SGH) de flebotomos y a la proteína recombinante rSP03B, así como la prevalencia y asociaciones entre L. infantum y los flebovirus Toscana y Sicilia. Entre los 692 hemodonantes analizados, las seroprevalencias frente a virus Toscana, virus Sicilia y L. infantum fueron 26%, 0% y 1%, respectivamente, y la prevalencia de PCR-L. infantum fue 2%. El 98% de hemodonantes presentaron anticuerpos frente a SGH y/o rSP03B, pero la correlación en la densidad óptica de estos antígenos fue relativamente baja (𝜌=0.39). Los anticuerpos frente a SGH estaban asociados a la infección por L. infantum y Toscana, pero no así la rSP03B, cuestionando su valor como marcador diagnostico en humanos. El Capítulo 4 analiza la diversidad genética de L. infantum en 38 humanos, 58 animales silvestres y 15 perros analizando la variabilidad del ADN del kinetoplasto y la región ITS2 mediante análisis de polimorfismos de nucleótidos simples (SNP) y polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP). El análisis de secuencias ITS2 indicó que las muestras eran L. infantum excepto un paciente ecuatoriano con L. panamensis. La variabilidad en secuencias ITS2-L. infantum fue baja. Por el contrario, el análisis de secuencias kDNA-L. infantum reveló 11 genotipos-SNP (variabilidad nucleotídica hasta 4.3%) y 4 genotipos-RFLP incluyendo los genotipos B, F y los nuevamente descritos S y T. Ambos métodos agruparon las variantes como predominantes o exclusivas de humanos, perros, fauna silvestre o comunes. Los resultados sugieren que L. infantum puede presentar distintos ciclos de transmisión independientes y simultáneos. El trabajo llevado a cabo para esta tesis doctoral contribuye a la comprensión de la exposición a flebotomos y de la prevalencia, transmisión y susceptibilidad de patógenos transmitidos por flebotomos y garrapatas en humanos, animales domésticos y fauna silvestre del sur de España y otras áreas donde estos patógenos están presentes, y enfatiza la importancia de un enfoque global y de “Una sola salud” para investigar y controlar estas infecciones.
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    Advances in the serological diagnosis of "Toxoplasma gondii" and "Neospora caninum" infections in the field of animal health
    (Universidad de Murcia, 2022-07-05) Huertas López, Ana; Cerón Madrigal, José Joaquín; Martínez-Carrasco Pleite, Carlos; Álvarez García, Gema; Escuela Internacional de Doctorado
    Introducción: la toxoplasmosis y la neosporosis son dos enfermedades causadas por los parásitos apicomplejos Toxoplasma gondii y Neospora caninum, respectivamente, que están distribuidos globalmente. La toxoplasmosis es una zoonosis y una de las principales causas de fallo reproductivo en pequeños rumiantes, con el consiguiente elevado impacto económico. Neospora caninum no es un patógeno zoonótico, pero es una de las principales causas de aborto en bovinos y también se asocia a fallos reproductivos en rumiantes. En la actualidad, el diagnóstico de estas parasitosis se basa con frecuencia en métodos serológicos, que podrían mejorar mediante la aplicación de una técnica más sensible como la fluorometría en tiempo retardado (TRFIA). Material y métodos: esta tesis se compone de tres actividades: (1) una revisión sistemática y meta-análisis sobre el desarrollo de nuevos métodos serológicos para diagnosticar toxoplasmosis en humanos y animales, enfocada a la perspectiva One Health y a analizar críticamente el proceso de validación; (2) un estudio de la seroprevalencia y factores de riesgo asociados a la infección por T. gondii en perros y gatos de un área antropizada (Bangkok, Tailandia); y (3) el desarrollo y validación de nuevas TRFIAs para detectar anticuerpos anti-T. gondii en suero de gatos y cabras, y anti-N. caninum en suero y leche de ovejas. En gatos, se evaluaron varios antígenos recombinantes y quiméricos mediante esta técnica. La validación analítica se basó en la estimación de la precisión intra- e inter-ensayo, sensibilidad (Se) analítica, exactitud y la reactividad cruzada con patógenos filogenéticamente relacionados. La validación diagnóstica se realizó mediante la evaluación del potencial discriminatorio entre positivos y negativos de la técnica (test de Mann Whitney), un análisis ROC (para la determinación del punto de corte óptimo, sensibilidad, especificidad -Sp- y área bajo la curva), la concordancia (usando el valor kappa) y el coeficiente de correlación de Spearman. Resultados: hay una falta de aplicación del enfoque One Health en los estudios sobre diagnóstico serológico de toxoplasmosis, especialmente en aquellos realizados en humanos y por investigadores médicos. El proceso de validación de nuevos métodos es muy heterogéneo y con frecuencia solo se realiza una validación diagnóstica y no analítica. La seroprevalencia de T. gondii en gatos y perros de Bangkok fue de 18,7% y 7,9%, respectivamente. Se desarrolló una TRFIA para detectar anticuerpos anti-T. gondii en gatos, en la que el antígeno quimérico TgSAG1-GRA8 obtuvo un mejor rendimiento diagnóstico en comparación con otros antígenos. Además, se desarrolló una TRFIA basada en el mismo antígeno quimérico para detectar anticuerpos anti-T. gondii en cabras con excelentes resultados en la Se analítica, y Se y Sp en el análisis ROC. Sin embargo, la reactividad cruzada con anticuerpos anti-N. caninum limita el uso de esta técnica. Finalmente, se desarrolló y validó una TRFIA basada en el antígeno recombinante NcGRA7 para detectar anticuerpos anti-N. caninum en suero sanguíneo y leche entera de ovejas, con alto rendimiento analítico y diagnóstico. Discusión y conclusiones: esta tesis doctoral aporta información nueva y actualizada sobre el desarrollo de métodos serológicos para diagnosticar infección por T. gondii en animales y humanos, destacando la necesidad de aplicación del enfoque One Health y del seguimiento del proceso de validación recomendado por la OIE. La elevada seroprevalencia de T. gondii en gatos y perros de Bangkok debería ser considerada como un riesgo para la salud pública en esta área antropizada. La nueva TRFIA desarrollada en esta tesis mejora la Se de las técnicas actuales de detección de infecciones por T. gondii y N. caninum y ha sido adaptada a muestras no invasivas, aunque se deberían evaluar mediante TRFIA nuevos antígenos de T. gondii para evitar la reactividad cruzada con N. caninum.
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    Open Access
    Caracterización de la patología asociada a diferentes grados de infestación por Sacorptes scabiei en cabra montés (Capra pyrenaica) impicaciones en la gestión de la sarcoptidosis
    (Universidad de Murcia, 2018-05-17) Espinosa Cerrato, José; Pérez Jiménez, Jesús María; Romero García, Diego; Facultad de Veterinaria
    La sarna sarcóptica, causada por el ácaro Sarcoptes scabiei, es una enfermedad contagiosa de la piel que afecta a los seres humanos y a una amplia variedad de mamíferos domésticos y silvestres. Un aspecto importante de esta enfermedad es su impacto en la fauna silvestre, donde sus efectos a nivel poblacional pueden ser catastróficos. En la Península Ibérica, las epidemias de sarna con efectos poblacionales más importantes son las que han afectado, entre otras, a las poblaciones cabra montés (Capra pyrenaica). En los últimos años han sido numerosos los estudios realizados sobre diversos aspectos relacionados con S. scabiei y la cabra montés. Sin embargo, todavía no se conocen bien todos los mecanismos implicados en la patogenia y por tanto cuales pueden ser las causas definitivas que ponen en riesgo la supervivencia del individuo. La presente tesis doctoral tiene como objetivo desenmascarar aspectos patológicos de la enfermedad hasta ahora desconocidos en esta especie, que evidencien la gravedad del proceso y que nos sirvan como base científica en la toma de decisiones frente a la enfermedad y que justifiquen la necesidad de mantener una población cautiva de este ungulado con garantías sanitarias. Para la consecución de nuestros objetivos, el estudio se centra en la población de cabra montés presente en el Espacio Natural Sierra Nevada (España), la más importante a nivel mundial en cuanto a número y variabilidad genética. Para ello se utilizaron cabras monteses infectadas de forma experimental con S. scabiei así como otras con infección natural procedentes del área de estudio. En nuestro estudio hemos evidenciado diversos aspectos patológicos relacionados con esta afección. El examen histológico de la piel reveló acantosis grave, hiperqueratosis, crestas epiteliales, edema espongiótico, exudado serocelular, pústulas eosinófilas, focos de exocitosis, células apoptóticas e hiperplasia de glándulas sebáceas, todos ellos intensificados por alteraciones del sistema colinérgico, mientras que los hallazgos histológicos más destacados en los tejidos no dérmicos fueron hiperplasia linfoide, leucocitosis, congestión y la presencia de depósitos amiloides severos, correlacionados con altos niveles de proteína amiloide sérica. Se aisló una amplia variedad de agentes bacterianos y la presencia simultánea de estos en piel sarnosa, linfonodos y órganos internos como pulmón, hígado, bazo y riñón fue compatible con un patrón septicémico de infección. Los niveles de albúmina, catalasa (CAT), glutatión peroxidasa (GSH-Px), superóxido dismutasa (SOD), paraoxonasa-1 (PON-1), glutatión reductasa (GR), la relación glutatión reducido (GSH): glutatión oxidado (GSSG), sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) y el estatus oxidante total (TOS) se midieron en sangre de cabras sanas y sarnosas. Los niveles de albúmina, PON-1, CAT, SOD, GSH-Px y la relación GSH: GSSG mostraron una disminución significativa con la progresión de la enfermedad, mientras que las concentraciones de TOS y TBARS aumentaron con la gravedad de las lesiones, indicando que esta infección aumenta el estatus oxidante y disminuye el estado antioxidante de la cabra montés. Se valoró la capacidad reproductiva en la hembra de cabra montés afectada por sarna. El número de estructuras ováricas (folículos primarios, folículos secundarios, folículos de Graaf, cuerpos lúteos y cuerpos albicans) se analizó histológicamente, evidenciándose que la sarna sarcóptica altera la dinámica folicular a través de una reducción en el peso corporal del huésped, cuyas principales consecuencias se observan en la maduración folicular y la capacidad ovulatoria. Dado la gravedad del cuadro clínico, se valoró la importancia de los cercados-reservorios como herramienta de gestión, conservación e investigación frente a la sarcoptidosis, así como las dificultades del mantenimiento de la especie en cautividad. Nuestro estudio muestra que la gravedad del proceso clínico así como la variedad de respuestas clínicas observadas en las cabras infectadas deben ser factores importantes a considerar en los planes de gestión frente a la enfermedad, sobre todo a la hora de decidir cuándo eliminar o no de la población aquellos animales que exceden cierto umbral de enfermedad. Por otro lado, la puesta en marcha de cercados-reservorios como herramienta de lucha frente a la sarcoptidosis es una estrategia ideal para la conservación de la especie, así como para la investigación de la enfermedad, siempre y cuando se sienten las bases de actuación y manejo que garanticen la estabilidad de la población cautiva. Sarcoptic mange, caused by the mite Sarcoptes scabiei, is a contagious skin disease that affects humans and a wide variety of domestic and wild mammals. An important aspect of this disease is its impact on wildlife, where its effects at the population level can be catastrophic. In the Iberian Peninsula, mange epidemics with the most important population effects are those that have affected, among others, the Iberian ibex populations (Capra pyrenaica). In recent years there have been numerous studies on various aspects related to S. scabiei and ibex. However, all the mechanisms involved in the pathogenesis are still not well understood and, therefore, the definitive causes that put the survival of the individual at risk. This doctoral thesis aims to unmask pathological aspects of the disease so far unknown in this species, which evidence the seriousness of the process and serve as a scientific basis for decision-making against the disease, and justify the need to maintain a captive ibex population with health guarantees. To achieve our goals, the study will focus on the ibex population present in Sierra Nevada Natural Space (Spain), the most important worldwide in terms of number and genetic variability. For this, we surveyed ibex that were both naturally and experimentally infested with S. scabiei. In our research we have evidenced various pathological aspects related to this disease. The histological study of the skin lesions revealed serious acanthosis, hyperkeratosis, rete ridges, spongiotic oedema, serocellular and eosinophilic crusts, exocytosis foci, apoptotic cells and sebaceous gland hyperplasia, all of them intensified by the cholinergic system alterations. The most prominent histological findings in non-dermal tissues were lymphoid hyperplasia, leukocytosis, congestion and the presence of severe amyloid deposits, correlated with high levels of serum amyloid A protein. A wide variety of bacterial agents were isolated and the simultaneous presence of these in mangy skin, lymph nodes and internal organs such as lung, liver, spleen and kidney was compatible with a septicaemic pattern of infection. Albumin, catalase (CAT), glutathione peroxidase (GSH-Px), superoxide dismutase (SOD), paraoxonase-1 (PON-1), glutathione reductase (GR), reduced glutathione (GSH): oxidized glutathione (GSSG) ratio, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and total oxidant status (TOS) concentrations were measured in peripheral blood of healthy and mangy ibex. The levels of albumin, PON-1, CAT, SOD, GSH-Px and GSH: GSSG ratio showed a significant decrease with disease progression and conversely, the concentrations of TOS and TBARS increased with lesion severity, showing that sarcoptic mange infestation increases oxidative stress and decreases antioxidant status in ibex. The reproductive cycle in female ibex affected by sarcoptic mange was evaluated. The number of ovarian structures (primary follicles, secondary follicles, Graaf follicles, corpus luteum and corpus albicans) was explored by histological analysis, evidencing that sarcoptic mange alters follicular dynamics through a reduction in host body weight, whose main consequences are noted in follicular maturation and ovulatory capacity. Given the severity of the clinical picture, the importance of stock reservoirs as a management, conservation and research tool against sarcoptidosis was assessed, as well as the difficulties of maintaining the ibex in captivity. Our works show that the severity of the clinical process as well as the variety of clinical responses observed in infested ibex must be important factors to consider in the management plans against the disease, especially when considering the decision to eliminate animals that exceed a certain disease threshold from a population. On the other hand the implementation of stock reservoirs as a tool to fight against the sarcoptidosis is an ideal strategy for conservation of the species as well as for research of sarcoptidosis, as long as they feel the bases of action and management that guarantee the stability of the captive population.
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    Distribution, dispersion and blood-feeding preferences of Phlebotomus spp. (Diptera, Psychodidae) in microenvironments in southeast Spain : implications for transmission of Leishmania infantum
    (Universidad de Murcia, 2021-01-14) Muñoz Hernández, Clara; Berriatua Fernández de Larrea, Eduardo; Ortiz Sánchez, Juana; Escuela Internacional de Doctorado
    Los flebotomos son artrópodos hematófagos vectores de Leishmania spp., agente etiológico de leishmaniosis humana y animal. Esta tesis doctoral presenta los resultados de varios estudios sobre la ecología de los flebotomos y la epidemiología de la leishmaniosis en zonas rurales y periurbanas de la Región de Murcia. En el Capítulo 1 se analiza la importancia de la localización de las trampas adhesivas de intercepción y atrayentes de luz y CO2 para capturar flebotomos en función de la distancia al suelo y a superficies verticales, en una perrera periurbana. Se capturaron 692 flebotomos identificados como Phlebotomus papatasi (52%), P. perniciosus (32%), Sergentomyia minuta (15%) y P. ariasi (<1%). Se observó una relación inversa entre la densidad de flebotomos y la distancia al suelo y a superficies verticales en trampas adhesivas y, en menor medida, en las de atracción, lo que a efectos prácticos permite un mayor margen de elección y la posibilidad de colocar estas últimas a cierta distancia del suelo para evitar la interferencia de animales. En el Capítulo 2 se estudia la distribución de flebotomos en tres rebaños ovinos y una perrera de una zona rural en relación con la distancia a los animales. Se capturaron con trampas adhesivas y de luz 8.506 flebotomos de las especies P. perniciosus (62%), Phlebotomus sergenti (23%), P. papatasi (8%), S. minuta (6%) y P. ariasi (1%). El número de flebotomos fue mayor en el interior de las instalaciones y cerca de los animales, a excepción de S. minuta, cuya abundancia fue máxima en zonas de campo alejadas de las granjas y de la perrera. Además, se observaron diferencias en la abundancia de P. perniciosus, siendo mayor la de las hembras en las trampas más próximas a los animales y la de los machos en lugares adyacentes habilitados para almacenar material. El estudio demuestra que las trampas de luz son más adecuadas para estudiar la distribución de P. perniciosus y, por tanto, el riesgo de transmisión de Leishmania infantum. En los Capítulos 3 y 4 se presentan trabajos sobre el papel epidemiológico de un zoológico periurbano en la transmisión local de L. infantum. Se combinó la vigilancia entomológica junto con la determinación de la tasa de infección por L. infantum y las fuentes de alimentación de flebotomos. Se capturaron 7.309 flebotomos con trampas de luz, incluyendo P. perniciosus (67%), P. papatasi (16%), S. minuta (14%), P. ariasi (2%) y P. sergenti (<1%). La distribución espacial de flebotomos fue muy heterogénea, dependiendo de la especie, el sexo y el estado reproductivo de las hembras. Se detectó sangre de 17 especies de hospedadores, mayoritariamente de gamo (Dama dama) y ciervo (Cervus elaphus). Sin embargo, los modelos estadísticos que consideraron el coste de movimiento del flebotomo para desplazarse hasta un hospedador junto con el censo de los animales disponibles, estimaron que la probabilidad de alimentación fue máxima para el ciervo y el eland (Taurotragus oryx), lo que sugiere que, en igualdad de condiciones, los flebotomos prefieren alimentarse de especies concretas. Además, no se detectó L. infantum en los 602 flebotomos analizados mediante PCR cuantitativa. Los resultados demuestran que los zoológicos pueden ser espacios ideales para el desarrollo de flebotomos, pero esto no implica necesariamente un mayor riesgo de infección por L. infantum en zonas colindantes, ya que los vectores se alimentan de especies que no son reservorios de la infección. A modo de síntesis, esta tesis doctoral aporta nueva información sobre la metodología de muestreo, la distribución espacial y las preferencias alimentarias de los flebotomos, así como de su papel en la epidemiología de la leishmaniosis, de utilidad en el control de la infección.
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    Estudio epidemiológico de las parasitosis en animales silvestres de ambientes antropizados de México
    (Universidad de Murcia, 2021-01-14) Muñoz García, Claudia Irais; Berriatua Fernández de Larrea, Eduardo; Martínez-Carrasco Pleite, Carlos; Escuela Internacional de Doctorado
    El 60-70% de la biodiversidad de todo el planeta se concentra en 17 países megadiversos, uno de ellos es México. En estos países existe una falta de datos específicos sobre su biodiversidad y hay una acelerada pérdida de especies debido a la alteración de sus ecosistemas, lo que ha favorecido la emergencia de enfermedades desde la fauna silvestre, debido principalmente al incremento de las tasas de contacto entre humanos y animales domésticos con los animales silvestres. Es así que estos países son de especial interés de vigilancia epidemiológica, en donde es imperativo ampliar el conocimiento de los patógenos, incluidos los parásitos, y sus hospedadores silvestres. La generación de conocimiento en países megadiversos es una base necesaria sobre la que ha de sustentarse no solo la adecuada conservación de sus ecosistemas, sino también una gestión sanitaria eficaz que permita el control y la prevención de las enfermedades emergentes y re-emergentes. La presente tesis doctoral tuvo como objetivos recopilar la información existente sobre los parásitos y enfermedades parasitarias registradas en la fauna silvestre de México, estudiar un caso de infección severa por el nematodo Pelecitus spp. en el ave rapaz Caracara cheriway y realizar dos estudios epidemiológicos sobre la infección por el protozoo Leishmania spp. en animales Pilosa (perezosos y hormigueros) y la infestación de garrapatas duras en hormigueros de la familia Myrmecophagidae. Como resultado de la recopilación bibliográfica, hemos evidenciado que el estado actual del conocimiento de parásitos en la fauna silvestre de México es escaso y heterogéneo, porque está limitado a ciertas regiones, grupos parasitarios y especies hospedadoras. Los grupos parasitarios y hospedadores más estudiados son los helmintos en peces y los ectoparásitos en mamíferos, y los menos son los protozoos. Por otra parte, las recopilaciones bibliográficas sobre el protozoo Leishmania spp. en mamíferos del orden Pilosa permitió inferir que únicamente el perezoso Choloepus hoffmanni puede considerarse reservorio del parásito, capaz de transmitir la infección al vector. Con respecto a los registros existentes de garrapatas Ixodidae en hormigueros de la familia Myrmecophagidae, las del género Amblyomma son las más comunes, muchas de las cuales pueden ser vectores de bacterias Rickettsiales. La descripción de la infección por Pelecitus en el hospedador carancho norteño es la primera realizada en México y destaca la gravedad de la infección y además, según demuestra la bibliografía, su potencial zoonósico y facilidad para saltar la barrera de especie. La investigación epidemiológica de Leishmaniosis revela por primera vez la infección por L. mexicana-amazonensis en el hormiguero norteño, en uno de 16 (6,3%) animales analizados y se señala la necesidad de estudiar su potencial de reservorio de este parásito. En el estudio de la infestación por garrapatas en hormigueros norteños se identificaron cuatro especies del género Amblyomma y Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.), viéndose afectados 10 de los 23 (43%) individuos examinados. Así mismo, se describe por primera vez la infestación por A. auricularium y R. sanguineus s.l. en este hospedador en México. Se puede concluir que las investigaciones realizadas en esta tesis doctoral evidencian importantes lagunas en el conocimiento sobre las enfermedades parasitarias y urge a continuar con la investigación de las parasitosis en animales silvestres de países megadiversos. Esto facilitaría la toma de decisiones para mejorar la conservación de su biodiversidad y prevenir la aparición de enfermedades emergentes. En este sentido, el trabajo ahonda también en los problemas asociados a la antropización del medio natural como el de los atropellamientos de la fauna silvestre y el del comercio ilegal de especies, y destaca la importancia de los centros de recuperación de fauna silvestre en la conservación de especies y en la vigilancia de enfermedades.
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    Helmintofauna del visón americano (Neovison vison), el lobo ibérico (Canis lupus signatus) y el zorro (Vulpes vulpes) en el noroeste de la península ibérica
    (Universidad de Murcia, 2020-01-17) Martínez Rondán, Francisco José; Ruiz de Ybáñez Carnero, María del Rocío; Martínez-Carrasco Pleite, Carlos; López Beceiro, Ana; Escuela Internacional de Doctorado
    En esta Tesis Doctoral se ha estudiado la helmintofauna de tres especies de carnívoros silvestres presentes en el noroeste de España: el visón americano (Neovison vison), que es un mustélido alóctono, el zorro (Vulpes vulpes) y el lobo ibérico (Canis lupus signatus), ambas especies de cánidos autóctonos. Actualmente, las poblaciones de estos tres carnívoros se encuentran en expansión, a pesar de la presión cinegética y las medidas de control a las que se encuentran sometidas sus poblaciones. El acercamiento de la fauna silvestre a las áreas antropizadas conlleva un mayor contacto, ya sea directo o indirecto, entre los animales domésticos y silvestres, además de con el propio ser humano, de manera que el riesgo epidemiológico de transmisión de agentes patógenos se incrementa en la interfaz doméstico-silvestre-humano. El estudio se ha realizado a partir de la necropsia de 50 visones americanos, 257 zorros y 83 lobos. Las vísceras torácicas y abdominales fueron diseccionadas, lavadas y su contenido filtrado para ser inspeccionado bajo el estereomicroscopio. Además, los pulmones fueron sometidos a un proceso de digestión en pepsina y ácido clorhídrico para facilitar la extracción de los helmintos. Los parásitos hallados fueron recuperados, lavados y conservados en etanol al 70% para su posterior identificación. Además, una porción de 94 cestodos procedentes de lobo fue conservada en etanol absoluto para su identificación específica mediante PCR. Los nematodos digestivos y cardiopulmonares fueron aclarados con lactofenol, mientras que los cestodos de lobo y zorro, así como los trematodos de visón americano, fueron teñidos con carmín acético de Semichon y, en todos los casos, se identificados con la ayuda de claves morfométricas. En el Capítulo 1 se estudian los helmintos gastrointestinales y cardiopulmonares del visón americano en Galicia, con el fin de dilucidar si este mustélido actúa como reservorio y diseminador de parásitos introducidos con esta especie invasora, o bien si se trata de un hospedador que se ha incorporado al ciclo biológico selvático de los helmintos propios de los mustélidos autóctonos y otros carnívoros silvestres del área colonizada. Se encontraron ocho especies de parásitos (seis nematodos y dos trematodos): Molineus patens, Aonchotheca putorii, Crenosoma melesi, Aonchotheca annulosa, Angiostrongylus daskalovi, Aelurostrongylus spp., Troglotrema acutum y un trematodo digestivo que no pudo ser identificado. Todas estas especies son nativas de los mustélidos europeos, siendo la primera cita de A. daskalovi y A. annulosa en el visón americano. Además, es la primera vez que se cita el trematodo T. acutum en el pulmón, siendo esta una ubicación ectópica. En el Capítulo 2 se describen las especies de nematodos cardiopulmonares presentes en el lobo ibérico y el zorro de Galicia y Asturias, discutiendo el papel epidemiológico que desempeñan en el anidamiento natural y la dispersión de estos parásitos, quienes también afectan al perro y desarrollan una destacada acción patógena sobre el hospedador. Se identificaron cuatro especies de nematodos: Angiostrongylus vasorum, Eucoleus aerophilus, Crenosoma vulpis y Filaroides hirthi. Las dos especies hospedadoras compartieron las mismas especies de nematodos, excepto F. hirthi, que sólo fue encontrada en lobos, siendo la primera vez que se cita este nematodo en este cánido a nivel mundial. La distinta prevalencia de estos parásitos en el zorro y el lobo está probablemente relacionada con las diferencias en sus respectivos comportamientos tróficos. En base a los resultados obtenidos, se plantea la hipótesis de que los nematodos cardiopulmonares han coevolucionado con sus respectivos hospedadores definitivos, intermediarios y paraténicos, de manera que los zorros se han convertido en los hospedadores que presentan las mayores prevalencias e intensidades de parasitación, en comparación con el lobo, lo que se podría interpretar como una adaptación por parte del superpredador, basada en una estrategia trófica que reduce el riesgo de infección. En el Capítulo 3 se describe la helmintofauna gastrointestinal del zorro y del lobo ibérico del noroeste de la península ibérica, analizando su papel epidemiológico en el mantenimiento y transmisión de estos parásitos, que poseen una especial importancia desde el punto de vista sanitario, ya que muchos de estos patógenos también pueden afectar a los animales domésticos e incluso al ser humano. Se detectaron un total de 13 especies de helmintos (cinco nematodos y ocho cestodos). Los nematodos Uncinaria stenocephala, Toxocara canis, Trichuris vulpis y los cestodos Taenia hydatigena, Taenia pisiformis, Taenia crassiceps, Mesocestoides spp. y Dipylidium caninum fueron identificados en ambos cánidos silvestres, mientras que Ancylostoma caninum y Taenia krabbei sólo se aislaron en lobos, siendo la primera vez que se describe este último cestodo en la península ibérica. Por último, Toxascaris leonina, Taenia polyacantha y Taenia taeniaeformis se encontraron exclusivamente en zorros. Además, mediante PCR se confirmó la presencia de los cestodos T. hydatigena y T. krabbei. Los zorros presentaron una helmintofauna típica de carnívoros que consumen pequeñas presas, como roedores, mientras que los lobos albergaron principalmente parásitos transmitidos por la ingestión de presas de gran tamaño, como son los ungulados. De esta forma, se evidencia que las particularidades ecológicas, principalmente tróficas, de la especie hospedadora son determinantes del tipo de helmintofauna gastrointestinal de cada uno de estos cánidos silvestres y, por tanto, también condicionan su papel epidemiológico en el mantenimiento del ciclo biológico y dispersión de estos parásitos. In this PhD thesis, the helminthfauna of three wild carnivore species present in northwestern Spain -the American mink (Neovison vison), an allochthonous mustelid, the fox (Vulpes vulpes) and the Iberian wolf (Canis lupus signatus), both native canid species- has been studied. Currently, the populations of these three carnivores are expanding, despite the hunting pressure and the control measures to which they are subjected. The approximation of wild fauna to anthropized areas entails a greater contact, either direct or indirect, between domestic and wild animals, as well as with humans, increasing the epidemiological risk of pathogen transmission in the domestic-will-human interface. The study was based on the necropsy of 50 American minks, 257 foxes and 83 wolves. The thoracic and abdominal viscera were dissected, washed and their contents filtered and subsequently examined under the stereomicroscope. In addition, the lung parenchyma was digested with pepsin and hydrochloric acid to facilitate the extraction of helminths. All the parasites were recovered, washed and preserved in 70% ethanol until identification. In addition, a portion of 94 wolf cestodes was preserved in absolute ethanol for specific identification by PCR. The digestive and cardiopulmonary nematodes were clarified with lactophenol, while wolf and fox cestodes, as well as American mink trematodes, were stained with Semichon’s acetic carmine for further identified using morphometric keys. In Chapter 1 we have described the gastrointestinal and cardiopulmonary helminths from the American mink in Galicia in order to evaluate the role of this mustelid as a reservoir and disseminator of parasites introduced simultaneously with this invasive species, or if this host has been incorporated to the sylvatic life cycle of helminths of autochthonous mustelids and other wild carnivores of the colonized area. Eight species of parasites (six nematodes and two trematodes) were found: Molineus patens, Aonchotheca putorii, Crenosoma melesi, Aonchotheca annulosa, Angiostrongylus daskalovi, Aelurostrongylus spp., Troglotrema acutum and a digestive trematode which could not be identified. All these species are native to European mustelids. This is the first report of A. daskalovi and A. annulosa in the American mink. and the first record of the trematode T. acutum in the lung, an ectopic location. In Chapter 2 we have described the cardiopulmonary nematode species present in Iberian wolves and foxes from Galicia and Asturias, discussing their epidemiological role in the natural nesting and dispersal of these parasites, which also affect the dog, inducing an important pathogenic action in the host. Four nematode species were identified: Angiostrongylus vasorum, Eucoleus aerophilus, Crenosoma vulpis and Filaroides hirthi. Both carnivores shared the same nematode species, except F. hirthi, which was only found in wolves, being the first report of this nematode in this canine worldwide. The different prevalence of these parasites in foxes and wolves is probably related to disparities in their respective trophic behavior. Based on our results, we hypothesized that cardiopulmonary nematodes have co-evolved with their respective definitive, intermediate and paratenic hosts, thus foxes have become the hosts with the highest prevalence and parasite intensity when compared to wolves. This could be considered as an adaptation of this top predator based on a trophic strategy which reduces their risk of infection. In Chapter 3 we have studied the gastrointestinal helminthfauna of foxes and Iberian wolves in the northwest of the Iberian Peninsula, analyzing their epidemiological role in the maintenance and transmission of these parasites, highly important from a sanitary point of view, since many of their pathogens can also affect domestic animals or even humans. A total of 13 helminth species (five nematodes and eight cestodes) were detected. The nematodes Uncinaria stenocephala, Toxocara canis, Trichuris vulpis, and the cestodes Taenia hydatigena, Taenia pisiformis, Taenia crassiceps, Mesocestoides spp. and Dipylidium caninum were identified in both wild canines, while Ancylostoma caninum and Taenia krabbei were only isolated in wolves, being the first description of this cestode in the Iberian Peninsula. Finally, Toxascaris leonina, Taenia polyacantha and Taenia taeniaeformis were found exclusively in foxes. In addition, the presence of cestodes T. hydatigena and T. krabbei were confirmed by PCR. Foxes showed a helminthfauna typically associated to carnivores which consume small prey, such as rodents. On the opposite wolves were mainly infected with parasites transmitted by the ingestion of large prey, such as ungulates. In this way, it is evident that the ecological particularities, mainly the trophic ones, of the host species are decisive for the gastrointestinal helminthfauna of each wild canid, and therefore, also determine their epidemiological role in the maintenance of the biological cycle and dispersion of these parasites.
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    Parasitofauna del gato doméstico (Felis catus) en el municipio de Murcia / Guillermo Doménech Asensi; director, Carlos Martínez-Carrasco Pleite.
    (Murcia : Universidad de Murcia, Departamento de Sanidad Animal,, 2007) Doménech Asensi, Guillermo
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    Parasitofauna del zorro rojo (Vulpes vulpes) en la Comunidad Valenciana
    (2016-03-08) Sanchis Monsonís, Gloria; Martínez-Carrasco Pleite, Carlos; Tizzani, Paolo; Facultad de Veterinaria
    El presente estudio sobre la parasitofauna del zorro rojo (Vulpes vulpes) se ha realizado en la Comunidad Valenciana, dentro del Programa de Vigilancia Epidemiológica sobre especies cinegéticas y salvajes. Entre mayo de 2006 y noviembre de 2013 se realizaron las necropsias de 286 zorros obtenidos de capturas autorizadas para el control de predadores, de atropellos o recogidos enfermos. Tras el análisis de las vísceras torácicas y abdominales, así como el examen de muestras de musculatura esquelética sometidas a una digestión artificial, se detectaron 26 especies de helmintos, incluyendo 16 especies de nematodos, 8 especies de cestodos, una especie de trematodo y una especie de acantocéfalo. La prevalencia de helmintos fue del 98,25% (281/286). La riqueza parasitaria media de helmintos fue de 5,1 (SD=2,42, rango 0-11). Se identificaron Mesocestoides spp. (prevalencia 75,87%), Pterigodermatites affinis (59,09%), Uncinaria stenocephala (58,39%), Eucoleus aerophilus (51,40%), Angiostrongylus vasorum (40,91%), Oxynema crassispiculum (34,97%), Crenosoma vulpis (27,97%), Joyeuxiella echinorrhynchoides (27,62%), Toxocara canis (26,57%), Toxascaris leonina (25,17%), Spirocerca lupi (22,03%), Macracanthorhynchus catulinus (14,69%), Taenia pisiformis (13,29%), Trichuris vulpis (11,54%), Pearsonema plica (4,20%), Mastophorus spp. (3,50%), Dipilydium caninum (3,15%), Taenia spp. (2,80%), Filaroides hirthi (1,75%, primera cita en el zorro de la Península Ibérica), Taenia polyacantha (1,05%), Dirofilaria immitis (1,05%), Brachylaima spp. (0,70%), Taenia hydatigena (0,70%), Taenia crassiceps (0,70%) y Trichinella spp. (0,70%, confirmándose que era T. britovi en un zorro), Taenia taeniaeformis (0,35%) y Physaloptera sibirica (0,35%). Además, es la primera vez que se cita en el zorro en la Península Ibérica la presencia de Tethratirydium en cavidad torácica. La detección de ectoparásitos se realizó en 272 zorros mediante el examen visual de la piel y mediante el examen microscópico de muestras de raspados cutáneos y del conducto auditivo del oído. El 90,8% de los zorros tuvo ectoparásitos (247/272). Se identificaron 24 especies de artrópodos, incluyendo 11 especies de ixódidos (Rhipicephalus turanicus: prevalencia 65,07%, Rhipicephalus pusillus: 28,68%, Ixodes hexagonus: 20,22%, Ixodes ricinus: 7,72%, Rhipicephalus sanguineus: 3,68%, Ixodes ventalloi: 2,21%, Hyalomma lusitanicum: 1,10%, Ixodes inopinatus: 0,74%, Dermacentor marginatus: 0,37%, Haemaphysalis sulcata: 0,37%, Haemaphysalis concinna: 0,37%), 10 especies de pulgas (Pulex irritans: 62,13%, Spilopsyllus cuniculi: 26,84%, Ctenocephalides canis: 9,56%, Ctenocephalides felis: 1,84% Odontopsyllus quirosi: 1,47% Archaeopsylla erinacei subsp. maura: 0,74%, Echidnophaga iberica: 0,74%, Chaetopsylla trichosa: 0,37%, Xenopsylla cunicularis: 0,37% y Nosopsyllus fasciatus: 0,37%), una especie de malófago (Trichodectes canis: 0,70%) y dos especies de ácaros (Sarcoptes scabiei: 2,80% y Otodectes cynotis: 0,35%). Es la primera cita de H. sulcata, E. ibérica y X. cunicularis en el zorro de la Península Ibérica. Se ha comprobado que todas las especies aisladas de helmintos y artrópodos presentaban un alto nivel de agregación parasitaria. Además, la riqueza de especies de helmintos está influida significativamente por el sexo y la edad, así como por el menor grado de urbanización y la latitud. Se comprueba que la presencia de varias especies de helmintos y garrapatas está correlacionada significativamente con la edad y el sexo, y también con factores extrínsecos tales como la latitud, altitud, la estación del año, el termoclima y el grado de urbanización. Nuestros resultados demuestran que los zorros de la Comunidad Valenciana son portadores de helmintos cuya importancia epidemiológica es muy destacada, ya sea por su carácter zoonósico (en particular Toxocara canis y Trichinella spp.), o por su acción patógena demostrada en perros (Spirocerca lupi y Angiostrongylus vasorum). Además, la riqueza de ixódidos y pulgas sugiere que el zorro puede participar de forma activa en la difusión de enfermedades transmitidas por vectores. Por tanto, este cánido silvestre es una especie clave para los estudios epidemiológicos en zonas periurbanas y rurales, donde su presencia debe ser valorada como un factor de riesgo sanitario. The present study investigated the helminth and ectoparasite species parasitizing the red fox (Vulpes vulpes) in the Valencia Community (south-east of Spain). The work was carried out in the context of a wildlife surveillance program developed by the Valencian Community authorities. Between May 2006 and November 2013 a total of 286 red foxes were necropsied. The animals were hunted under official permits or killed by traffic accidents. During necropsy, thoracic and abdominal viscera were processed to determine the presence of helminth species. Moreover, a sample of skeletal muscle was analyzed. A total of 26 helminth species were identified, including 16 nematodes, 8 cestodes, one trematode and one acanthocephalan. The helminth prevalence was 98.25% (281/286), and the mean helminth richness was 5.1 (SD=2.42, range 0-11). Foxes harboured the following nematode and cestode species: Mesocestoides spp. (prevalence 75.87%), Pterigodermatites affinis (59.09%), Uncinaria stenocephala (58.39%), Eucoleus aerophilus (51.40%), Angiostrongylus vasorum (40.91%), Oxynema crassispiculum (34.97%), Crenosoma vulpis (27.97%), Joyeuxiella echinorrhynchoides (27.62%), Toxocara canis (26.57%), Toxascaris leonina (25.17%), Spirocerca lupi (22.03%), Macracanthorhynchus catulinus (14.69%), Taenia pisiformis (13.29%), Trichuris vulpis (11.54%), Pearsonema plica (4.20%), Mastophorus spp. (3.50%), Dipilydium caninum (3.15%), Taenia spp. (2.80%), Filaroides hirthi (1.75%, being the first report for this nematode in the red fox from the Iberian Peninsula), Taenia polyacantha (1.05%), Dirofilaria immitis (1.05%), Brachylaima spp. (0.70%), Taenia hydatigena (0.70%), Taenia crassiceps (0.70%), Trichinella spp. (0.70%, with a case of T. britovi), Taenia taeniaeformis (0.35%) and Physaloptera sibirica (0.35%). Moreover, the study represent the first report of Tethratirydium larvae in the thoracic cavity of red fox. The presence of ectoparasites was evaluated in 272 red foxes through visual and microscopic examination of the skin and ear canal. Ninety-eight percent of the animals were found positives for ectoparasites. Twenty-four ectoparasite species were identified: 11 ixodid ticks (Rhipicephalus turanicus: prevalence 65.07%, Rhipicephalus pusillus: 28.68%, Ixodes hexagonus: 20.22%, Ixodes ricinus: 7.72%, Rhipicephalus sanguineus: 3.68%, Ixodes ventalloi: 2.21%, Hyalomma lusitanicum: 1.10%, Ixodes inopinatus: 0.74%, Dermacentor marginatus: 0.37%, Haemaphysalis sulcata: 0.37%, Haemaphysalis concinna: 0.37%), 10 fleas (Pulex irritans: 62.13%, Spilopsyllus cuniculi: 26.84%, Ctenocephalides canis: 9.56%, Ctenocephalides felis: 1.84% Odontopsyllus quirosi: 1.47% Archaeopsylla erinacei subsp. maura: 0.74%, Echidnophaga iberica: 0.74%, Chaetopsylla trichosa: 0.37%, Xenopsylla cunicularis: 0.37% and Nosopsyllus fasciatus: 0.37%), one mallophagus louse (Trichodectes canis: 0.70%) and two mites (Sarcoptes scabiei: 2.80% and Otodectes cynotis: 0.35%). This work represent the first report of H. sulcata, E. iberica and X. cunicularis for red fox in the Iberian Peninsula. All helminths and ecoparasites showed a high degree of aggregation. Helminth richness and the prevalence of different parasite species were significantly affected by host (sex and age) and environmental factors (presence of urban areas, latitude, altitude, season and climate). The results demonstrate that foxes in Valencia Community are carriers of helminths whose epidemiological role is noticeable, either because of their zoonotic potential (specially Toxocara canis and Trichinella spp.), or for their pathogenicity in dogs (Spirocerca lupi and Angiostrongylus vasorum). Finally, ixodid and flea richness suggests that the red fox can actively participate in the spread of vector-borne diseases. This wild canid is a key species for epidemiological studies in periurban and rural areas, and its presence should be evaluated as a health risk factor.
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    Regulación de la diapausa y emergencia del ectoparásito aviar Carnus hemapterus : factores abióticos, microclima y mecanismos implicados
    (2015-02-02) Amat Valero, María Teresa; Valera Hernández, Francisco; Facultad de Veterinaria
    Para poder entender el efecto de los parásitos sobre los hospedadores y la evolución de las interacciones parásito-hospedador es necesario comprender primero el efecto de los factores ambientales sobre estos organismos y su interacción, lo que a su vez requiere considerar tales factores a la escala adecuada según los organismos implicados. El objetivo principal de esta tesis es estudiar el efecto de factores abióticos, particularmente la temperatura, en la regulación de la diapausa del ectoparásito Carnus hemapterus. Este insecto es un díptero hematófago generalista con amplia distribución geográfica que parasita a los pollos de una gran variedad de especies aviares (en su mayoría trogloditas). El trabajo se desarrolló en una localidad árida del sureste de España (desierto de Tabernas), donde coexisten entremezclados tres tipos de hábitats (oquedades naturales en taludes de ramblas, cavidades en construcciones humanas, - principalmente puentes - y cajas nido) ocupados por Carnus hemapterus y sus hospedadores aviares. Como primer paso se determinó mediante sensores el microclima de las tres cavidades donde Carnus desarrolla su diapausa. Las características microclimáticas mostraron notables diferencias, siendo las cajas nido más inestables (frías y con marcada oscilación térmica), mientras que las otras oquedades fueron mucho más estables, presentando las cavidades en taludes condiciones más cálidas y secas que las de puentes. Esta heterogeneidad ambiental tiene importantes implicaciones tanto para los organismos endotermos que las habitan como para los ectotermos. Mediante experimentos de campo realizados con diversos hospedadores se comprobó en condiciones naturales la coexistencia de diapausas largas y cortas. Dado que la duración del ciclo de vida y número de generaciones al año (voltinismo) está determinado por la duración de la diapausa, registramos consecuentemente la coexistencia de moscas uni y bivoltinas tanto a nivel de población como de nido. Estos resultados muestran la naturaleza facultativa de la diapausa de Carnus así como el papel de las variables abióticas en la modulación de aquella. El estudio con cámaras climáticas de la influencia de la temperatura en la finalización de la diapausa y el patrón de emergencia mostró que aunque los choques de frío no son necesarios para que se termine la diapausa de Carnus, sí tienen importantes efectos, acelerando el desarrollo de la diapausa, adelantando la emergencia y acelerando su progreso respecto a condiciones constantes. Además, mediante experimentos en campo, comprobamos que las características térmicas particulares de los diversos microhábitats modularon el progreso de la diapausa, el comienzo de la emergencia y su patrón. En microclimas inestables (cajas nido) la fenología de emergencia se adelantó en la estación, pero su progreso fue más lento, alargando el periodo de emergencia en comparación con los microhábitats estables (puentes y taludes) entre los que no hubo diferencias en la emergencia. Comprobamos experimentalmente la consistencia de estos resultados cuando las diferencias microclimáticas fueron anuladas (homogeneizadas) en dos momentos de la fase de la diapausa; durante la diapausa invernal y al final de la fase de desarrollo de la post-diapausa. Estos resultados sugieren posibles procesos de adaptación o aclimatación a los microclimas. También se reveló la mayor sensibilidad de Carnus a cambios térmicos justo antes de la emergencia, lo que favorecería la percepción del cambio ambiental por la presencia del hospedador en el nido y consecuentemente la sincronización de la emergencia del parásito. El estudio de los requerimientos térmicos del parásito desveló que el desarrollo de la post-diapausa necesitó acumular menor cantidad de unidades de calor (grados día) en cajas nido, pero debido a las condiciones térmicas (fuerte oscilación con temperaturas extremas), el desarrollo fue ralentizado, necesitando más tiempo para desarrollarse que en cavidades térmicamente estables. En estas últimas cavidades los requerimientos térmicos fueron mayores (sobre todo en taludes), mostrando una tasa de emergencia similar entre ellas, pero acelerada con respecto a cajas nido. En definitiva, la presente tesis revela la importancia de considerar los factores abióticos a pequeña escala, así como los mecanismos que están actuando en la regulación del ciclo vital de parásitos para poder abordar futuros estudios fisiológicos, ecológicos o evolutivos entre otros. SHORT SUMMARY Understanding the impact of parasites in their hosts and the evolution of host-parasite interactions requires previous knowledge on the effect of environmental factors on such organisms and its interaction. For this, it is critical to consider such factors at the appropriate scale, defined by the organisms under study. The main objective of this thesis is to study the effect of abiotic factors, particularly temperature, on the regulation of diapause of the ectoparasite Carnus hemapterus. This insect is a generalist haematophagous dipteran with a large geographic distribution that parasitizes nestling of a wide variety of bird species (mainly troglodyte ones). This work was developed in an arid locality in the southeast of Spain (Tabernas´ desert), where three types of habitats (natural burrows at sandy cliffs in the ramblas, cavities in human constructions, - mainly bridges - and nest boxes) coexist interspersed and are occupied by Carnus hemapterus and its avian hosts. Firstly, the microclimate of the three cavity types, where the diapause of Carnus takes place, was studied by data-loggers and considerable differences were found: nest boxes were colder and with marked thermal oscillation, while the temperature in the other cavities was much more stable. Moreover, burrows showed warmer and drier conditions than cavities in bridges. This environmental heterogeneity has important implications for the organisms (both endotherms and ectotherms) that inhabit these cavities. Field experiments performed with different host species in natural conditions revealed the co-occurrence of long and short diapauses. Since the duration of the life cycle and the number of generations per year (voltinism) is determined by the length of the diapause, we registered consequently, the co-occurrence of uni and bivoltine flies at both population and nest level. These findings illustrate the facultative nature of diapause of Carnus and the modulating role of abiotic variables. Experimental tests with climatic chambers of the influence of temperature in the termination of diapause and the emergence pattern showed that, although cold shocks are not necessary for the end of the diapause, they stimulate the development of diapause, advance the emergence and accelerate its progress when compared to constant conditions. Furthermore, by means of field experiments, we checked that the particular thermal features of the microhabitats modulated the progress of the diapause, the emergence start and its pattern. In habitats with fluctuating microclimate (nest boxes) the phenology of emergence occurred earlier in the season, but its emergence progress was slower, making the emergence longer compared with stable microhabitats (cavities in bridges and burrows) where no differences in emergence were found. We confirmed experimentally the consistency of such results when the microclimatic differences were removed in two different moments of the diapause: during the winter diapause and at the end of the development phase of the post-diapause. These findings suggest adaptation or acclimatization of individuals to specific microclimates. Also, a higher sensitivity of Carnus to thermal changes just before emergence was revealed, what would favor the perception of environmental changes due to the presence of the host in the nest and, consequently, the synchronization of the parasite emergence. The study of the thermal requirements of the parasite revealed that its post-diapause development needed to accumulate less heat units (degree day) in nest boxes than in the other cavity types. Yet, due to sharp thermal oscillation with extreme temperatures, the development was likely decelerated by development arrests. Thus, flies from nest boxes needed more time to develop than flies from thermally stable cavities. Flies from cavities in bridges and burrows showed higher thermal requirements (mainly in burrows), being the emergence rate similar between them, but faster when compared with flies from nest boxes. Finally, this thesis reveals the importance of considering the abiotic factors at a small scale and the mechanisms acting in the regulation of the life cycle of parasites before addressing future physiological, ecological or evolutionary studies.
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    The role of wild carnivore carcasses in the transmission of infectious agents : epidemiological and ecological aspects
    (Universidad de Murcia, 2021-01-20) Gonzálvez Juan, Moisés; Martínez-Carrasco Pleite, Carlos; Moleón Paiz, Marcos; Escuela Internacional de Doctorado
    Esta tesis doctoral profundiza en las consecuencias epidemiológicas de las interacciones entre la fauna silvestre y los cadáveres de mamíferos carnívoros en tres zonas montañosas del sureste de España. Además, se evalúa el grado de interdisciplinaridad, el uso de terminología ecológica y los argumentos que sustentan la transmisión trófica de patógenos en estudios en la interfaz silvestre-doméstico-humano. En el Capítulo 1 realizamos una revisión sistemática para conocer el estado actual del conocimiento sobre la transmisión de parásitos por consumo de carne en la interfaz silvestre-doméstico-humano. También evaluamos el grado de interdisciplinaridad de los equipos de investigación y la precisión en el uso de términos ecológicos, así como la base científica de los argumentos que sustentaron las conclusiones epidemiológicas. La mayoría de los artículos justificaron la transmisión trófica de parásitos utilizando exclusivamente referencias bibliográficas o afirmaciones sin base científica. Además, los términos ecológicos en muchas publicaciones estaban ausentes y, cuando se mencionaban, solían ser imprecisos o incorrectos. Esta falta de precisión y rigor puede deberse a que las publicaciones han sido mayoritariamente realizadas por equipos unidisciplinares. Estos resultados remarcan la necesidad de establecer colaboraciones entre investigadores formados en Ecología y Epidemiología en estudios epidemiológicos en la interfaz silvestre-doméstico-humano. En los Capítulos 2 y 3 investigamos el comportamiento de los vertebrados ante cadáveres de carnívoros, con especial atención a la interacción entre el zorro rojo (Vulpes vulpes) y los cadáveres de congéneres para la transmisión de parásitos vía trófica y no trófica. Se monitorizaron 56 cadáveres de zorro y 10 de otros mesocarnívoros durante 7-10 semanas utilizando cámaras trampa en tres zonas montañosas del sureste de España, con diferentes comunidades de vertebrados y grados de antropización. Los zorros fueron muy eficientes en detectar la carroña de mesocarnívoro. No obstante, el comportamiento generalizado consistió en evitar el consumo o retrasarlo varias semanas, sobre todo entre congéneres. Las especies carroñeras contactaron más frecuentemente con los cadáveres, probablemente por sus hábitos alimenticios. En cuanto a los eventos de zorros, el contacto fue más frecuente y temprano en cadáveres heteroespecíficos, retrasándose varias semanas en congéneres. Para el frotamiento se observó un patrón similar entre ambos tipos de carroña, aunque la frecuencia fue mayor en cadáveres de zorro. En cambio, el marcaje fue más frecuente en cadáveres de congéneres, probablemente porque son utilizados como puntos de información de larga persistencia. Nuestros resultados sugieren que la decisión de consumir cadáveres de congéneres está probablemente condicionada por dos fuerzas contrarias: el alto valor nutritivo de los congéneres y el riesgo de adquirir parásitos. Demostramos que la carroña de carnívoro es un componente fundamental en el "paisaje de la aversión" de los carnívoros. En relación con las interacciones no tróficas, los zorros evitaron el contacto temprano con la carroña probablemente para reducir el riesgo de infección por parásitos de transmisión no trófica, especialmente en congéneres. Sin embargo, el estrecho contacto causado por el frotamiento puede jugar un papel importante en la transmisión de ectoparásitos. Los eventos de marcaje también podrían suponer un riesgo epidemiológico en los lugares donde se encuentran los cadáveres, ya que algunos patógenos excretados por orina y heces pueden permanecer en el cadáver o en sus inmediaciones durante mucho tiempo. Por ello, la estrategia del zorro para reducir el riesgo de infección parece ineficaz frente a algunos parásitos de transmisión no trófica. En general, esta tesis doctoral proporciona un conocimiento detallado de las interacciones ecológicas entre la carroña de carnívoro y los vertebrados. Esta información es una base fundamental para inferir las consecuencias epidemiológicas derivadas de estas relaciones. Además, animamos a incrementar las colaboraciones interdisciplinares en estudios epidemiológicos en la interfaz silvestre-doméstico-humano desde una perspectiva One Health.

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